Светофильтры для микроскопа и их применение- OpticalMarket
Светофильтры широко используются в микроскопии как для визуальных наблюдений, так и для микрофотографии. Чаще всего фильтры изготавливаются из матового, нейтрального или цветных стекол. Светофильтры позволяют выборочно блокировать или уменьшить интенсивность определенной длины волны, пропуская другие. С помощью фильтров удается компенсировать оптические искажения и недостатки системы освещения, и в результате получить наилучшее возможное качество изображения. Однако, следует учитывать, что введение в оптический ход лучей микроскопа любого дополнительного элемента, в частности и светофильтра, приведет к поглощению им света, что в результате может снизить освещенность препарата и негативно сказаться на качестве изображения, построенного микроскопом. Поэтому стоит руководствоваться следующим «правилом»: в микроскоп необходимо устанавливать фильтр только в том случае, если от его использования будет реальная польза. Еще раз повторим, «реальная»!!!
В базовой комплектации микроскопа зачастую сразу поставляется несколько светофильтров. Как правило, чаще всего пользователю попадаются синий (голубой), зеленый, желтый и матовый фильтр. Давайте же разберемся, в каких ситуациях их целесообразно использовать.
Синий или голубой фильтр также зачастую называют фильтром дневного света. Данный фильтр полезно использовать в микроскопах, в которых в качестве источника освещения используется лампа накаливания (вольфрамовая лампа) или галогеновая лампа. Применение голубого светофильтра позволяет сбалансировать цветопередачу, придать изображению более холодный, естественный оттенок, добиться эффекта дневного света, более комфортного для глаз, чем нескорректированный жёлтый свет. Галогеновые лампы дают свет ближе к белому, поэтому с ними можно использовать более тонкие синие светофильтры. Лампы накаливания и галогеновые лампы имеют тенденцию изменять свою цветовую температуру в зависимости от интенсивности освещения.
А вот светодиодные лампы лишены подобного недостатка. При низкой интенсивности освещения лампа характеризуется красным цветом, при высокой интенсивности – голубым, что приводит к существенному цветовому сдвигу (искажению цветов). Данный недостаток может оказаться особенно критичным при занятии микрофотографией. Полученные снимки характеризуются преобладанием теплых желто-оранжевых оттенков, в особенности на заднем плане. Установленный над линзой коллектора либо в фильтродержателе конденсора биологического микроскопа синий светофильтр, абсорбирует красную часть спектра, и в результате мы получаем более естественную цветопередачу. Делая фотоснимки, также настроить правильную цветопередачу можно с помощью настройки баланса белого в программе захвата и обработки изображения.В качестве практического примера можно указать, что тонкий синий светофильтр повышает цветовую температуру на 200 градусов. Таким образом, при исследовании образцов, окрашенных гематокилин-эозином, применение синего фильтра позволит добиться всегда четких микрофотографий с правильной цветопередачей.
Зеленый интерференционный светофильтр. Лабораторные микроскопы чаще всего оснащены ахроматическими или планахроматическими объективами, в которых сферическая аберрация наилучшим образом исправлена относительно зеленого цвета. Таким образом, зеленый фильтр позволяет улучшить качество изображения, формируемого данными объективами. Также стоит отметить и то, что фазово-контрастные объективы сконструированы таким образом, чтобы строить снимки наилучшего качества, с наивысшим контрастом в фазово-контрастном методе исследования в зеленом цвете. Хотя согласно последних исследований для фазово-контрастной микроскопии могут быть полезными светофильтры и других цветов.
Матовый светофильтр (диффузор) используется, чтобы еще больше рассеять свет при необходимости настройки диффузного освещения. Зачастую используется в микроскопах, где в качестве источника освещения выступает лампа накаливания. Кроме того, матовые светофильтры могут оказаться крайне полезными при работе с объективами с малым увеличением. Так, используя их вместо дополнительной линзы под конденсором, удается равномерно осветить всё поле зрения объектива.
Желтый светофильтр широко используется для наилучшей настройки цветового баланса в микроскопах с галогеновыми лампами и лампами накаливания для микрофотографии с цветной пленкой. Желтый светофильтр снижает цветовую температуру. Также желтый светофильтр может оказаться полезным при работе с металлографическими микроскопами для обнаружения дефектов структуры металлических поверхностей.
Нейтральные фильтры чаще всего применяются для настройки времени экспозиции, особенно при работе с камерами с фиксированной выдержкой затвора. Нейтральные фильтры позволяют уменьшить интенсивность освещения, в случае слишком яркого освещения для комфортных визуальных наблюдений и микрофотографии. Цвет – нейтрально серый. С помощью таких фильтров удается уменьшить интенсивность проходящего света на части или всем спектре длин волн, не оказывая заметных изменений на цветовую температуру. Различают два вида нейтральных фильтров: абсорбирующие и отражающие.
Фильтры для окрашенных образцов. Тонкие срезы биологических образцов, тканей зачастую подвергаются окраске одним или даже несколькими органическими красителями, чтобы улучшить видимость определенных элементов структуры препарата. Интенсивность и оттенки большинства окрашенных биологических препаратов буду отлично воспроизведены на цветном фотоснимке, но некоторые красители могут выглядеть блеклыми, иметь цветовой сдвиг, особенно в случае нескольких окрашиваний. В таких случаях полезными окажутся компенсационные цветные светофильтры, они помогут восстановить все или почти все потерянные цвета, правда, могут повлиять и на соседние участки образца и задний фон. Такая проблема зачастую встречается при работе с эозином, фуксином, метиленовым синим. Образцы, окрашенные данными красителями, на фотоснимках выглядят мутными, с недостатком насыщенности цветового оттенка. А чтобы нейтрализовать данный эффект, применяются специальные фильтры дидимий (дидимиевые фильтры), изготовленные из особого сорта стекла. Так, например, бледно-красный фильтр из дидимиевого стекла улучшает изображение образцов, окрашенных гематоксилин-эозином. В отличие от обычного стекла, в состав дидимиевого стекла также входят два редкоземельных элемента – неодим и празеодим. Дидимиевые фильтры сильно поглощают световое излучение. Смешанные в различных пропорциях, редкоземельные элементы неодим и празеодим дают спектр поглощения, с пропусканием в одной только узкой части видимого спектра, например, в красной. Таким образом, дидимиевые фильтры вовсе не усиливают ничего, а как раз, наоборот, как бы равномерно «приглушают» все цвета, кроме одного. Что в результате, в общем-то, как раз и выглядит, как усиление оставшегося.
Естественно, существуют и специальные поляризационные фильтры (фильтр-поляризатор и фильтр-анализатор) для проведения исследований методом поляризованного света; флуоресцентные фильтры (узкополосные светофильтры для возбуждения флуоресценции, т.
е. возбуждающие фильтры, и запирающие светофильтры, поглощающие возбуждающие флуоресценцию лучи, защищая ваши глаза и позволяя вам видеть излучение только той части препарата, которая флуоресцирует). Но это уже отдельная тема для следующей статьи, где мы постараемся более подробно рассмотреть специальные методы микроскопии и фильтры, применяемые в них.Автор статьи: Галина Цехмистро
← Типы оптических систем стереомикроскопов | Измерение объектов с помощью микроскопа →
Светофильтры
Фотоколориметр со светофильтром с максимальным светопоглощением при >. = 412 нм и кюветой с толщиной слоя 20 мм.[ …]
Фотометр с зеленым светофильтром ( = 560 нм).[ …]
Фотометр с фиолетовым светофильтром (X = 410 нм).[ …]
Фотометр с сине-зеленым светофильтром (к — 500 нм).[ …]
Минимум светопоглощения светофильтра должен совпадать с максимумом поглощения раствора. Когда спектр поглощения раствора неизвестен, то подбирают такой светофильтр, чтобы его окраска была дополнительной к окраске раствора; например, для окрашенных в желтый цвет растворов применяют синий светофильтр и, наоборот, для красных — синий и зеленый и т. д.[ …]
Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм и использованием светофильтра с максимумом светопропускания 440 нм. Измерение проводится относительно раствора сравнения, не содержащего цианацетилциазон.[ …]
Можно также измерять светопоглощение полученного окрашенного раствора в фотоколориметре с синими светофильтрами (А, = 470 ммк).[ …]
Перемешивают и оставляют на 30 мин. при комнатной температуре, после чего колориметрируют при зеленом светофильтре (№ 5) в кювете на 5 мл. При колориметрировании во вторую кювету наливают ту же смесь, что и в опыте, но перекись водорода заменяют 1 мл воды.[ …]
Оптическую плотность окрашенных растворов по отношению к контрольной пробе измеряют на ФЭК-56М с синим светофильтром № 3 = 453 ммк в кюветах с рабочей длиной 3 мм. Концентрацию пластификатора находят по градуировочному графику 0=1 (С).[ …]
По охлаждении растворов измеряют величину оптической плотности на фотоколориметре, используя сине-зеленый светофильтр (490—500 нм) по отношению к раствору сравнения (№ 1 по таблице) не содержащему определяемого вещества. [ …]
Фотоколориметры, прокалиброванные по набору стандартных растворов различных концентраций, темно-фиолетовый светофильтр (№ 1 для ФЭК Н-57, № 2 для ФЭК.Н- 6).[ …]
Замер оптической плотности производят на фотоэлектрвколо-риметре Ф К-М: кюветы толщиной исследуемого слоя 50 мм, светофильтр — зеленый, отсчет производят по правому барабану. Нулевым раствором служит холостая проба, содержащая все реактивы и дистиллированную воду.[ …]
Последнее ускоряется путем ее легкого встряхивания. Раствор колориметрируют против растворителя (дитизона) с зеленым светофильтром в кюветах размером 10 мм.[ …]
Применяемые в фотометрии приборы состоят из четырех частей, последовательно расположенных одна за другой: источник света, светофильтр или монохроматор, кювета с раствором, детектор (фотоэлемент, превращающий энергию излучения в электрическую).[ …]
Задача качественного анализа усложняется, когда смесь состоит из нескольких люминесцирующих веществ; в этом случае применяют светофильтры или сочетание люминесцентного анализа с хроматографическим. Наиболее избирательные методы анализа основаны на спектральном разложении света люминесценции и изучения спектральных характеристик люминесценции спектрофотометрическим методом.[ …]
Калибровочная кривая фото-тиндалемера (а) и сравнение светорассеяния в разных суспензиях (б) |
Через 10 мин., после добавления реактивов измеряют оптическую плотность окрашенных растворов на фотоэлектронолоримет-ре ФЭК-М (кювета — 50 мм, светофильтр — синий, барабан — правый).[ …]
Построение калибровочной кривой проводят так же, пак описано выше, т.е. готовят серию эталонных растворов в СС14 и определяют их оптическую плотность на ФЭК-56, пользуясь кюветой Н£ 10 мм и светофильтром № I (длина волны 315 мак). Нулевую точку устанавливают по СС14. По полученным величинам строят калибровочную кривую, откладывая на оси абсцисс содержание экстрагируемых Ееществ (мг/50 мл), а на оси ординат -оптические шштноста.[ …]
С учетом результатов систематических спектрометрических измерений оптической плотности центрифугированной днепровской воды, а также выражения для коэффициента пропускания эффективного потока светофильтра произведено сопоставление результатов инструментальных и визуальных измерений. На цветовой диаграмме хуг, рекомендованной Международным комитетом по освещенности для источника белого света, нанесены величины тэ (%), вычисленные с использованием экспериментальных данных (рис. 3.5, а). Этот способ позволяет обозначить спектральные кривые цветности днепровской воды и вод других источников в разные сезоны года в виде отдельных точек на поле диаграммы.[ …]
Построение градуировочных графиков.[ …]
Ход анализа. В кювету с толщиной слоя 1 см вносят исследуемый раствор сточной воды, добавляют 3—4 капли индикатора, тщательно размешивают стеклянной палочкой и, закрыв кювету крышкой, измеряют оптическую плотность раствора при выбранных светофильтрах (£>„ и £)т). Находят значение Нпт = ВпЮт и по формуле (96) вычисляют pH.[ …]
После разделения слоев нижний (водный) слой отбрасывают, а верхний слой — (экстракт) фильтруют через сухой без-зольннй фгльтр «белая лента» в сухую кювету. Колорметри-рование ведут со светофильтром X 4 в кюветах с толщиной слоя Юнн. Нулевую точку фотоэлектроколорииетрэ устанавливают по контрольной пробе. В качестве контрольной пробы берут дистиллированную воду (20 нл) и обрабатывают согласно описанной дате методике (количество реактивов для контрольной пробы Удваивают.).[ …]
Для определения оптической плотности полученного окрашенного раствора его помещают в кювету фотоколориметра, расстояние между стенками которой равно 2 см, и наливают во вторую кювету раствор «холостого» опыта. При измерении пользуются зелеными светофильтрами (Х=508 ммк).[ …]
Содержание БОг находят по калибровочной кривой, для построения которой готовят стандартную шкалу (табл. 226). Окраска устойчива в течение 30 мин.[ …]
Работая с 2г-ЭХЦ, к 10 мл водной пробы или шкалы, содержащей 0,1—8 мкг иона фтора, прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного реагента. Через 5 мин измеряют уменьшение оптической плотности относительно контрольных растворов в кювете с толщиной слоя 2 см с зеленым светофильтром (№ 6) в ФЭК-56.[ …]
Перед началом измерений щель выводилась в центр дифракционной картины. Контроль за правильной установкой щели осуществлялся с помощью микроамперметра 8. Вертикальное расположение щели избавляло от помех, обусловленных вертикальной рефракцией. Интерференционный светофильтр 6 и корпус 4 приемника надежно защищали ФЭУ от фоновой засветки. Нейтральный светофильтр 16 ослаблял полный поток с тем, чтобы его измерения проводить в том же режиме работы ФЭУ, что и потока через щель. Самописец 9 типа Н-110 включался в режиме логарифмирования входного сигнала. Таким образом, разность отсчетов б на ленте самописца при переключении прибора была равна отношению потоков через щель и объектив, выраженному в децибелах. Выбранный режим работы прибора и способ измерений исключали влияние нестабильности работы лазера и прозрачности атмосферы на получаемые данные.[ …]
При содержании токсикантов в пробе [ …]
Световой поток от лампы 1 с помощью двух конденсор-пых линз 2 и 2а направляется в обе стороны и проходит через теплозащитные стекла 3 и За, поглощающие инфракрасное излучение ламп. Далее, отразившись от зеркал 4 п 4а, световой поток проходит через светофильтры 5 и 5а, линзы 6 и 6а, кюветы 7 и 7а и попадает на сурьмяно-цезиевые фотоэлементы 11 и 11а. Фотоэлементы включены через усилители на стрелочный нуль-гальванометр по дифференциальной схеме таким образом, что при равенстве фототоков, возникающих под действием лучистой энергии, стрелка гальванометра устанавливается на отметке 0.[ …]
Ход определения. Емкость с отобранной пробой воздуха открывают, обмывают стенки ее водой и измеряют полученный объем раствора. Для анализа отбирают 1 мл в колориметрическую пробирку, вносят 0,5 мл раствора хромотроповой кислоты, 3,5 мл концентрированной серной кислоты и осторожно перемешивают (разогревание). После охлаждения измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на ФЭК 56 со светофильтром -№ 7 или на ФЭК-Н-57 со светофильтром № 6. Содержание формальдегида определяют по калибровочному графику, построенному из дозированных количеств стандартного раствора формальдегида, обработанных в условиях, аналогичных с пробами. [ …]
Содержимое колбы после добавления каждого реактива перемешивают и в конце доводят объем до метки дистиллированной водой. Экстинкцию окрашенного раствора измеряют на ФЭК-56 с зеленым светофильтром (№ 6) или на спектрофотометре при 510— 515 нм (образовавшееся окрашенное комплексное соединение стабильно в течение часа).[ …]
Ход определения. Фильтр снимают с патрона, переносят в стакан и обрабатывают сначала 15 мл смеси бензола с этиловым спиртом (1:3), затем дважды 15 мл этилового спирта. Все три порции растворителя сливают вместе и для анализа отбирают 5 мл в колориметрическую пробирку. В пробирку вносят 0,5 мл концентрированного аммиака и через 1,5 ч измеряют оптическую плотность исследуемых растворов на фотоэлектроколориметре, пользуясь кюветой с толщиной слоя 10 мм и синим светофильтром (Я = 460 ммк).[ …]
Переносят отобранную порцию раствора в пробирку, прибавляют 0,5 мл изопропилового спирта, 0,5 мл раствора фенилгидра-зина, хорошо перемешивают и дают постоять 10 мин. Затем приливают 0,3 мл раствора гексацианоферрата (III) калия и через 5 мин добавляют 2 мл раствора едкого натра. Через 4 мин раствор разбавляют до 20 мл дистиллированной водой и через 10 мин измеряют его оптическую плотность по отношению к раствору «холостого» опыта, применяя кюветы, расстояние между стенками которых равно 2 см, и зеленые светофильтры (>.=570 ммк).[ …]
В тех малых концентрациях, в каких гексацианоферраты (Н) [Fe(CN)e]4- встречаются в сточных водах, их с достаточной точностью можно определять колориметрическим методом, основанным на известной реакции образования берлинской лазури. В ,слабокислой среде и при концентрации ионов [Fe(CN)6]4 , не превышающей 12 мг/л, образующаяся берлинская лазурь не выпадает в осадок, а остается в виде устойчивого синего коллоидного раствора. Заканчивать определение можно как измерением оптической плотности полученного раствора на фотоколориметре с оранжево-красными светофильтрами (>.=610 ммк), так и визуальным сравнением полученной окраски с окрасками шкалы стандартных растворов. [ …]
Отобрав 2,5 мл полученного раствора, к нему приливают 0,2 мл раствора фурфурола в этиловом спирте и 0,5 мл раствора едкого натра, после чего оставляют на 30 мин при комнатной температуре. Затем приливают 15 мл разбавленного (2 : 5) раствора серной кислоты, перемешивают и определяют оптическую плотность полученного окрашенного раствора в фотоколориметре, перелив этот раствор в кювету (расстояние между стенками 3 см). В другую кювету прибора помещают раствор, полученный в «холостом» опыте, в котором 2,5 мл дистиллированной воды обрабатывают так же, как и анализируемый раствор.[ …]
В градуированные пробирки с азотнокислым свинцом приливают 0,05 М раствор буры до объема 7-8 мл; 0,2 мл 0,05 н раствора НС£ ; 0,2 мл свежеприготовленного 1% раствора железистосинеродистого калия; 0,3 мл % раствора щавелевокислого аммония; 0,4 мл 1[ …]
Ход определения. Отбирают такое количество сточной воды, чтобы в ней содержалось от 5 до 50 мкг цинка, и разбавляют (или выпаривают) до 20 мл. Полученный раствор разбавляют до 50 мл водой и приливают к нему 10 мл 0,02%-ного раствора родамина С (или родамина Б), после чего переносят раствор в кювету, расстояние между стенками которой равно 1 см, и определяют его светопоглощение в фотоколориметре с красными светофильтрами (>„=610—650 ммк). Нулевым раствором служит раствор, полученный в «холостом» опыте с 20 мл дистиллированной воды, к которой прибавляют все реактивы, введенные в пробу анализируемой сточной воды.[ …]
Ход определения. Вату из аллонжа переносят в стакан и про-! мывают трижды по 5 мл диэтиловым эфиром. Промывают гофрированную трубку с силикагелем 12—20 мл эфира. Обе вытяжки соединяют вместе. Эфир выпаривают на водяной бане при 35— 40°С. К сухому остатку прибавляют 2 мл раствора персульфата аммония и нагревают 10 мин на кипящей водяной бане, охлаждают, приливают 2 мл раствора мочевины и нагревают на кипящей бане 5 мин. После охлаждения вносят 1 мл раствора молиб-дата аммония и 1 мл раствора аскорбиновой кислоты. Нагревают на кипящей бане 1 мин, охлаждают и измеряют оптическую плотность раствора на фотоколориметре с красным светофильтром при длине волны 660 нм в кювете с толщиной слоя 0,5 см.[ …]
Ход определения, а) Определение при отсутствии резорцина и пирокатехина. Отбирают 4 мл раствора выделенных фенолов (или нейтрализованной сточной воды, если она бесцветна) и переносят в градуированную пробирку, снабженную притертой пробкой. Прибавляют 0,05 мл аммиачного раствора сульфата кадмия и 0,1 мл 25%-ного раствора аммиака. Через 10 мин определяют оптическую плотность полученного окрашенного раствора, перелив его в кювету фотоколориметра с расстоянием между стенками, равным 1 см. В другую кювету наливают раствор «холостого» опыта, в котором 4 мл дистиллированной воды обрабатывают так же, как и анализируемый раствор. Измерения производят с фиолетовыми светофильтрами ( = 413 ммк).[ …]
Отбирают такую порцию фильтрата, чтобы в ней содержалось от 0,05 до 5 мкг азота нитритов, нейтрализуют титрованным раствором кислоты или щелочи до pH 6,5—7,5 (необходимое количество кислоты или щелочи можно найти титрованием другой порции фильтрата по бромтимоловому синему или феноловому красному) и разбавляют водой, не содержащей нитритов, до 50 мл. Затем прибавляют 1 мл раствора сульфани-ловой кислоты и тщательно перемешивают. Величина pH полученной смеси должна быть около 1,4. Дают постоять от 3 до 10 мин, затем приливают 1,0 мл раствора а-нафтиламина, 1,0 мл раствора ацетата натрия и хорошо перемешивают. Полученный окрашенный раствор должен иметь pH в границах от 2,0 до 2,5. Через 10—30 мин определяют его оптическую плотность в фотоколориметре с зелеными светофильтрами (А,=520 ммк) .[ …]
Ход определения. Пробу анализируемой воды ( 200 мл ¡при. содержании ксантогенатов 0,025—1,0 мг/л 100 мл при содержании ксантогенатов 1,0—10,0 мг/л и 25 мл при содержании: ксантогенатов 10:—80 мг/л) переносят в делительную воронку и осторожно нейтрализуют свободную кислоту или щелочь, добавляя по каплям при сильном перемешивании 0,1 н. раствор щелочи или кислоты. Требуемое для нейтрализации количество этого раствора определяют, титруя отдельную пробу анализируемой воды с применением в качестве индикатора метилового оранжевого. Затем приливают 5—10 мл ацетатного буферного раствора, имеющего pH 5,2, и 5 мл 0,04 М раствора сульфата никеля и экстрагируют толуолом, добавляя его маленькими: порциями (по 1 —1,5 мл), пока толуольный экстракт не станет бесцветным. Все экстракты соединяют вместе, разбавляют толуолом в мерной колбе до определенного объема, переносят весь окрашенный раствор или его часть в кювету (толщина слоя 2 см) и измеряют светопоглощение, применяя синие светофильтры ( = 450—480 ммк). Во вторую кювету фотоколориметра наливают при этом чистый толуол.[ …]
Синее возбуждение | Nikon’s MicroscopyU
В ассортимент флуоресцентных фильтров синего возбуждения Nikon входят шесть тщательно сбалансированных комбинаций, содержащих либо полосовые, либо длиннопроходные эмиссионные (барьерные) фильтры, способные избирательно изолировать флуоресцентное излучение через узкую или широкую полосу зеленого, желтого, красного, и ближней инфракрасной областях спектра. В этом интерактивном учебном пособии показано, как вариации спектральных профилей фильтров возбуждения и излучения, а также профилей дихроматических зеркал влияют на уровни сигнала, общую производительность фильтра и контрастность изображения в комбинациях, разработанных для возбуждения флуорофоров в синей области.
Учебное пособие инициализируется случайным образом выбранным флуоресцентным образцом, появляющимся в окне Образца , а полосовое излучение ( B-2E ; по умолчанию) синим спектральным профилем комбинации фильтров возбуждения отображается в Спектральные профили набора фильтров график. Комбинированные спектры пропускания и отражения фильтра накладываются на спектры поглощения и излучения синего поглощающего флуорофора, используемого для маркировки образца (спектральные профили флуорофора не включены для автофлуоресцентных образцов растений). Спектры поглощения флуорофора представлены в учебнике с использованием коричневой заливки, а соответствующие спектры излучения представлены серой заливкой. Характеристики длины волны для комбинации фильтров, обозначенной цифрой 9Ползунок 0008 Filter Set
отображается в желтом поле в правом нижнем углу руководства. Эти значения постоянно обновляются при перемещении ползунка слева направо.Для работы с учебным пособием используйте ползунок Набор фильтров для перехода между различными комбинациями фильтров, доступными для синего возбуждения. При перемещении ползунка слева направо спектральные профили фильтров возбуждения и барьера, а также дихроматического зеркала модифицируются, чтобы имитировать изменения спектральных профилей. Обратите внимание, что постоянно меняющиеся спектральные профили не подразумевают, что возможна любая комбинация фильтров, равно как и отдельные наборы фильтров не являются переменными (без физического изменения фильтров) в отношении спектральных профилей. Изменения спектральных профилей между выбранными наборами фильтров просто предназначены для того, чтобы помочь установить взаимосвязь между комбинациями фильтров, используемыми в каждом оптическом блоке.
Индивидуальные спектры фильтров (возбуждение, излучение и дихроматическое зеркало) можно добавить или удалить из графика Спектральные профили наборов фильтров , установив или сняв соответствующие флажки под графиком. Кроме того, с помощью аналогичного набора флажков можно добавить или удалить спектры поглощения и испускания флуорофора ( Spectral Cross Sections ). Изображение образца меняется одновременно с профилями фильтров, чтобы отразить изменения контраста и уровней сигнала, вызванные изменениями комбинаций фильтров, вызванными перемещением ползунка. Новый образец можно выбрать в любое время с помощью Выберите раскрывающееся меню Образец , и флуорофоры, использованные для маркировки выбранного образца, будут перечислены непосредственно под окном меню. Во многих случаях образцы окрашивают двумя или более флуоресцентными зондами, чтобы продемонстрировать избирательное выделение флуоресценции с помощью наборов полосовых и длиннопроходных барьерных (эмиссионных) фильтров.
Комбинации фильтров синей флуоресценции Nikon охватывают диапазон длин волн возбуждения от 420 до 495 нанометров с профилями ширины полосы пропускания 20, 30, 40 и 70 нанометров. В пяти комбинациях используется одно и то же дихроматическое зеркало, а в шестом наборе используется зеркало с меньшей длиной волны для увеличения получаемого сигнала. Полосовые барьерные фильтры для комбинаций фильтров синего возбуждения Nikon имеют спектральную ширину 40 нанометров. Один из фильтров ( B-3A ) предназначен для использования с вольфрамово-галогенным освещением.
Комплекты с полосовыми эмиссионными фильтрами серии Nikon для возбуждения синей флуоресценции, B-1E , B-2E и B-2E/C , создают изображения с различными уровнями контрастности с глубоким зеленым цветом на угольно-черный фон и идеально подходят для многоцветной флуоресцентной визуализации с другими комбинациями фильтров возбуждения. Комбинации полосового излучения предназначены для устранения или, по крайней мере, значительного уменьшения (в зависимости от спектральных характеристик) флуоресценции желтых, красных и ближних инфракрасных флуорофоров в образцах, помеченных несколькими зондами. Как правило, комбинации фильтров, использующие полосовые компоненты излучения, обеспечивают более высокое отношение сигнал/шум, чем комбинации, использующие фильтры длинного пропускания, и изображения имеют визуально более темный фон, хотя и с меньшей общей яркостью.
Во всех трех комбинациях фильтров, имеющих полосовые эмиссионные фильтры, используется одно и то же дихроматическое зеркало (отсечка 505 нм) и аналогичные эмиссионные фильтры с полосой пропускания 40 нм. Набор B-1E оснащен узкополосным фильтром возбуждения с центром на 480 нм, тогда как набор B-2E отличается только наличием широкой полосы возбуждения с центром на 470 нм. Полоса пропускания излучения комбинации B-2E/C смещена на 5 нанометров в сторону более коротких длин волн, чтобы оптимизировать обнаружение популярных флуорофоров ( FITC и др.). Средняя полоса пропускания фильтра возбуждения в наборе B-2E/C предназначена для исключения перекрестного обнаружения желтых и оранжевых флуорохромов, используемых в конкретных методах многократного мечения или контрастного окрашивания.
Комбинация фильтров B-1A включает узкополосный фильтр возбуждения (20 нм), который предназначен для минимизации фотообесцвечивания, а также автофлуоресценции образца при возбуждении более короткими длинами волн в синей области спектра. Дихроматическое зеркало в 9Набор фильтров 0008 B-1A имеет длину волны отсечки 505 нанометров, которая используется в большинстве наборов синего возбуждения. Барьерный фильтр длинного пропускания пропускает излучение с длиной волны выше 520 нм, позволяя обнаруживать широкий спектр флуорохромов, излучающих в зеленой, желтой, оранжевой и красной областях длин волн. Набор фильтров B-2A , содержащий аналогичные компоненты, но с более широкой полосой пропускания возбуждения 40 нм, считается стандартным набором синего возбуждения Nikon. Широкая полоса возбуждения в центре синей области спектра сочетается с длиной волны отсечки дихроматического зеркала на 5 нанометров ниже (500 нанометров), чем у других блоков фильтра синего возбуждения. Эта комбинация обеспечивает более яркий сигнал излучения, чем наблюдаемый с B-1A набор для многих популярных флуорохромов.
Набор фильтров B-3A сочетает в себе то же дихроматическое зеркало и эмиссионный фильтр, что и набор B-1A , но с очень широкой полосой пропускания возбуждения 70 нм (420–490 нм), чтобы максимизировать энергию, доступную для флуорохромов. поглощает практически любую длину волны в синей области спектра. Набор предназначен для использования в первую очередь с вольфрамово-галогенным освещением, хотя он также может быть полезен с лампами дугового разряда при использовании датчиков с очень слабым сигналом излучения. Длина волны отсечки дихроматического зеркала 505 нанометров в сочетании с длиннополосным фильтром излучения (отсечка 520 нанометров) позволяет обнаруживать широкий спектр флуорохромов, излучающих зеленые, желтые, оранжевые и красные длины волн. Технические характеристики дихроматических зеркал и фильтров из различных комбинаций синего фильтра Nikon приведены в Таблице 1.
Соавторы
Анна Скордато и Стэнли Шварц — отдел биологических наук, Nikon Instruments, Inc., 1300 Walt Whitman Road, Melville, New York 11747.
Мэтью Дж. Парри-Хилл , Томас Дж. Феллерс , Лайонел Парсонс-младший , Кимберли М. Фогт , Ян Д. Джонсон и Майкл В. Дэвидсон — Национальная лаборатория сильного магнитного поля, 1800 г., восток, доктор Пол Дирак, штат Флорида Университет, Таллахасси, Флорида, 32310.
Цветной фильтр — синий — 490 нм SWP
Цветной фильтр — синий — 490 нм SWP количество
Артикул: 102356524 Корзина 3.D.6 Категории: фильтр синего цвета, цветной фильтр, краевой фильтр, коротковолновые пропускающие фильтры Теги: 490нм, синий, цвет, край, короткая волна
- Описание
- Технические данные
- Отзывы (0)
Описание продукта
Щелкните здесь, чтобы загрузить данные передачи Дихроичные цветные фильтры 9№ 0009Синие цветовые фильтры PIXELTEQ обеспечивают равномерный яркий цвет для всех видов приложений освещения и обнаружения. Конструкция коротковолнового дихроичного фильтра пропускает только более короткие волны видимого синего цвета и отражает более длинные видимые волны. В фильтрах синего цвета PIXELTEQ, также известных как тонкопленочные или интерференционные фильтры, используются многослойные покрытия с твердым напылением, которые обеспечивают надежную работу без сдвига без выцветания или старения в светильниках с высокой светоотдачей.
Дихроичные цветные фильтры в сравнении с абсорбционными фильтрами
В отличие от абсорбирующих цветных стеклянных или полимерных гелей, эти тонкопленочные интерференционные фильтры практически не абсорбируют, обеспечивая превосходную передачу, насыщенные синие цвета и подлинный срок службы. Фильтры синего цвета также имеют крутой краевой переход между полосой пропускания с более короткой длиной волны и полосой отражения с большей длиной волны — гораздо более крутой, чем цветное стекло или полимерные гели.
Пользовательские опции OEM
Доступны специальные цвета, соответствующие определенной длине волны отсечки, и откалиброванные цвета CIE, разработанные для вашего конкретного источника освещения и оптики для обеспечения целевого цветового вывода. Эти цветовые фильтры могут быть размещены на градиентных колесах или флажках для плавного смешивания переменных цветов CMY или RGB. Несколько цветов также могут быть микроструктурированы для полноцветных и фотореалистичных эффектов изображения и гобо. В дополнение к индивидуальным покрытиям оптика поставляется в форме, подходящей для вашего приложения — с определенными подложками, формами и размерами.
Интегрированные решения
Цветовые фильтры обычно сочетаются или комбинируются с другими типами фильтров для оптимизации производительности в конкретном приложении. Во многих случаях оптимизированная конструкция OEM сочетает в себе несколько покрытий на одной и той же оптике для повышения производительности, размера и веса устройства. Некоторые из этих дополнительных типов фильтров включают:
- Фильтры коррекции цвета: регулируют коррелированную цветовую температуру от одного типа лампы, чтобы она соответствовала другому
- Узорчатые цветные фильтры: плавное смешивание цветов от полной до нулевой насыщенности, а также комбинации для точного смешивания широких и насыщенных цветовых гамм
- Цветные гобо: многоцветные и полноцветные гобо с микроузором для создания фотореалистичных изображений и эффектов с высоким разрешением
- УФ – ИК-фильтры: пропускают видимые цвета, блокируя вредное ультрафиолетовое и/или инфракрасное излучение.Синий светофильтр длина волны: Таблица цветов светодиодов (по длине волны света, нм/nm)