Зм 6а: Доступ ограничен: проблема с IP

Отзывы о товаре

Сертификаты

Обзоры

Цены и наличие товара во всех магазинах и складах обновляются 1 раз в час. При достаточном количестве товара в нужном вам магазине вы можете купить его без предзаказа.

Цена в магазинах — розничная цена товара в торговых залах магазинов без предварительного заказа.

Срок перемещения товара с удаленного склада на склад интернет-магазина.

Представленные данные о запчастях на этой странице несут исключительно информационный характер.

2286b1dd88d96e332224cbaf26f05ed7

Добавление в корзину

Код для заказа:

Доступно для заказа:

Кратность для заказа:

Отменить

Товар успешно добавлен в корзину

!

В вашей корзине на сумму

Закрыть

Серия объективов «ЗМ» | [ПРО]ФОТО

ЗМ — семейство советских фотографических зеркально-линзовых объективов, созданных на основе научных исследований проф. Максутова. Является вторым поколением зеркально-линзовых фотообъективов после «МТО».

Объектив для зеркальных камер с резьбовым соединением М42. Данный объектив устанавливается на современные зеркальные и беззеркальные камеры через соответствующий переходник. Читать статью о переходниках.

Расшифровка названия — «Зеркальный Максутова» или «Зеркально-Менисковый объектив». Длиннофокусные объективы семейства «ЗМ» предназначены для однообъективных зеркальных фотоаппаратов. Использование зеркально-менисковой конструкции позволило уменьшить длину и массу объективов в сравнении с линзовой. Зеркально-линзовые («ЗЛ») объективы «ЗМ» не имеют органов управления диафрагмой, значение относительного отверстия постоянное.

Кольцо фокусировки выполнено «с перебегом», это нужно чтобы при сильных изменениях температуры, относительно «нормальной», объектив не утрачивал возможности фокусироваться на крайние значения шкалы расстояний (бесконечность). Побочное следствие такого конструктивного решения является возможность устанавливать объективы на фотоаппараты с несколько бо́льшим рабочим отрезком, чем 45,5 мм, не утрачивая при этом фокусировку на «бесконечность» (например, на камерах с байонетом «Nikon F», где рабочий отрезок равен 46,5 мм).

В обозначениях объективов «МС» означает многослойное просветление; «А» — применение сменного адаптера

 

• ЗМ-1 прототип
• ЗМ-3 прототип
• ЗМ-3 среднеформатный
• ЗМ-4А
• ЗМ-5А
• МС ЗМ-5А (обзор)
• МС ЗМ-5СА
• ЗМ-6А
• МС ЗМ-6А
• ЗМ-6Б среднеформатный
• МС ЗМ-7

Из-за особенности конструкции объектива, источники света, да и вообще любые блики в зоне нерезкости превращаются в «бублики».

Для работы на цифровых фотоаппаратах вам понадобится переходник с М42х1. Возможно использование как на Nikon, так и на Canon. За счет запаса хода кольца фокусировки.

Заказывая вещи по ссылкам ниже, вы помогаете проекту покрывать расходы на содержание сайта и развитие. Список переходников, системы и байонеты (прямые ссылки для заказа)

При заказе стоит учитывать то, что дешевые переходники некачественного исполнения с линзой на байонете Nikon F значительно портят картинку. Переходники без линзы уменьшают максимальную дальность фокусировки (из-за разницы рабочих отрезков). Переходники с чипами попадаются некачественные, от этого может страдать экспозамер и подтверждение фокусировки на некоторых моделях Canon EOS.

Светофильтры

В комплекте с объективами «ЗМ» для малого формата (24×36 мм) шёл набор из 4-х, или расширенный из 5-и (только с «ЗМ-7») светофильтров. Этот набор светофильтров был очень популярен у советских объективов, и является базовым. (В скобках указаны старые названия до 1974 года):

• «УФ-1×» («ЖС10» или «ЖС-12»)
• «О-2,8×» («ОС-12» или «ОС-14»)
• «ЖЗ-2×» («ЖЗС-9»)
• «Н-4×» («НС-7» или «НС-8»)
• «Н-2×» (только с объективом «ЗМ-7»)

Такой же по составу 4-штучный комплект светофильтров имели объективы «МТО-500А», с, как минимум, 1970 года.

Объективы «Рубинар» также имеют светофильтры из этого набора, но в различных урезанных вариантах, за исключением объектива «Рубинар 10/1000», у которого комплект малых (задних) светофильтров М35,5х0,5 состоит из 5-и штук и аналогичен комплекту «ЗМ-7».

Факты

• Объективы «ЗМ» имели знак качества СССР.
• Объектив «МТО-11» отличается от других объективов «МТО» тем, что имеет конструктив и оптическую схему как у объективов семейства «ЗМ».
• Объективы с адаптером «А» более совместимы с современными фотоаппаратами не только из-за того что можно установить разъём крепления под разные фотоаппараты, но и потому что «А»-адаптер значительно выступает за заднюю стенку объектива и благодаря этому отсек вспышки фотоаппарата не упирается в объектив.

——

Я хочу попросить Вас о нескольких вещах. Об обмене опытом в комментариях к записям, например, или может быть, альтернативным мнением, которое тоже имеет место быть, ведь так? Или может, у Вас есть крутые референсы, которые Вы можете предоставить для размещения, сопроводив их своим опытом и переживаниями? Отлично, это то, что необходимо мне. Нам. Всем посетителям сайта. Это поможет новичкам сориентироваться, а тем, кто это уже все прошел — лишний раз побрюзжать про фото . )

Все, кто помогают, так или иначе, даже такой мелочью, как образцы изображений, объективов, куски текстов со своим развернутым мнением — в раздел благодарности. Здесь не хватает и Вас. Спасибо за внимание.

Алексей Гвоздев, главвред портала.

——

Удлинитель 3N-3-SMART 3гн 3м 6А без з/к (8233 IN HOME)

Код товара: 335417

• г. Новосибирск ул. Никитина 11

  Нет

• г. Новосибирск ул. Семьи Шамшиных 58

  Нет

• г. Томск ул. 79 Гвардейской Дивизии 3

  1

• г. Томск ул. Елизаровых 46/1

  Нет

• г. Томск ул. Розы Люксембург 141а

  от 1 до 5

• г. Томск ул. Иркутский тракт 142/3

  Нет

• г. Северск пр. Коммунистический 161

  Нет

Доставка

Бесплатная доставка по Томску и Новосибирску, условия.

ЗМ-65х21 Задвижка шиберная прямоточная.

Напишите нам

ЗМ-65х21 Задвижка шиберная прямоточная.

Предлагаем к поставке задвижки шиберные прямоточные:

ЗМ-65х21 МПа21, (psi 3000) L350мм, H610мм, D65мм тип присоединения 63х35 РД 26-16-40-89.

ЗМ-65х21 МПа21, (psi 3000) L422мм, H610мм, D65мм тип присоединения 65х21-П27 ГОСТ 28919-91
(2. 9/16»x3000-R27 6A API).

Задвижка шиберная прямоточная ЗМ-65х21 используется в качестве запорной арматуры на нефтяных и газовых скважинах.

Класс материалов корпусной группы и элементов запорных органов задвижек зм-65х21 по спец. 6А API.

Температура рабочей среды задвижки зм-65х21 до +121^оС.

Температура окружающей среды среды задвижки зм-65х21 от минус 60^оС до +40^оС.

 Задвижки выпускаемые согласно спецификации 6А API на температурный класс от L (-46^oC до +82^оС) до V (+2^оС до +121^оС).

Корпусные детали задвижки зм-65х21 изготавливаются методом штамповки, это обеспечивает их высокую прочность.

Уплотнение шпинделя задвижки зм-65х21  изготавливается из набора колец шевронного или одного кольца типа RVF фирмы Busak+Shamban, что наряду с двумя опорными подшипниками значительно снижает крутящий момент на маховике.

Соединение адаптера со шпинделем выполнено через срезной штифт, что исключает поломку деталей задвижки зм-65х21.

Присутствует задняя опора шпинделя, это позволяет заменить основное уплотнение при наличии давления в задвижке зм-65х21.

Задвижка зм-65х21 укомплектована указателем положения запорного органа.

Почем совок?: ravvinoff — LiveJournal

Ленинград — почем звонят колокола

Объективы

Вега-12Б 1000 — 1500 р.

Волна-9 3000 — 3200 р.

Зенитар-16 4800 — 5000 р.

Зенитар-МЕ1 от 4000 р.

ЗМ-5СА 2000 — 2500 р.

ЗМ-5А 3000 — 3200 р.

ЗМ-6А 3000 — 3500 р.

Мир-1 1200 — 1300 р. (белый М39, Загорский)

Гелиос-40 10000 — 12000 р. (белый М39)

Гелиос-40-2 15000 — 18000 р.

Гелиос-44 1000 — 1500 р. (М39 с 13-ю лепестковой диафрагмой)

Гелиос-44-2 700 — 800 р. (чёрный М42)

Гелиос-44М, 44М-4 и 44М-5 900 — 1100 р.

Гелиос-44М-6, 44М-7 и 77М-4 1500 — 1800 р.

Гелиос-81Н 1600 — 2000 р.

Гранит-11Н 1800 — 2300 р.

Индустар-50-2 300 — 450 р.

Индустар-61-ЛЗ-МС 1000 — 1200 р.

Калейнар-5Н 4000 — 4500 р.

Мир-1В 800 — 900 р.

Мир-1Ш 1000 — 1200 р.

Мир-10А 2500 — 2800 р.

Мир-20Н 1800 — 2500 р.

Мир-24Н 2500 — 3000 р.

Мир-3

PCS ARSAT H 2,8/35 — 3000 р.

МИР 67 Н — 3000 р.

Мир-38В (65 mm) — 1200 р.

Волна-3 (80 mm) — 1500 р.

Мир-26В (45 mm) — 2000 р.

МТО 1000 — 5000 р.

Оберон-11К 4000 — 5000 р.

Юпитер-3 2800 — 3000 р.

Юпитер-6 8000 — 9000 р.

Юпитер-8 800 — 1200 р.

Юпитер-9 4000 — 5000 р. (белый М39 зеркалочный, Красногорский)

Юпитер-9 3000 — 4000 р. (белый М39 зеркалочный Лыткаринский)

Юпитер-9 2500 — 3000 р. (чёрный М42 зеркалочный Лыткаринский)

Юпитер-9 2000 — 2500 р. (белый М39 дальномерный)

Юпитер-11 800 — 1200 р.

Юпитер-21А 6500 — 7000 р.

Юпитер-21М 1600 — 2000 р.

Юпитер-37А 1500 — 2000 р.

Таир-3А 2200 — 2600 р.

Tair-3S 2000 — 2300 р. (от комплекта ФотоСнайпер)

Таир-11 2000 — 2200 р. (белый М39)

Таир-11А 2300 — 2500 р.

Телезенитар-К 4.5/300 12000 — 15000 р.

Фотоаппараты

Ломо ЛК-А  — 2000 р.

Киев 6С — 2500 р. (с объективом Вега-12)

Полароид 636 (closeup) — 100-500 р.

ZM 6A 6,3 / 500 зеркальный мениск российский объектив для Nikon / top35mm.com

ЗМ-6А 6,3 / 500 — Зеркально-менисковая линза с многослойным ахроматическим покрытием. ЗМ-6А — классический образец инженерной мысли советской эпохи. Это зеркальный телеобъектив с фокусным расстоянием 500 мм по конструкции …

ZM-6A 6,3 / 500 История объектива

Зеркально-менисковая линза с многослойным ахроматическим покрытием.ЗМ-6А — классический образец инженерной мысли советской эпохи. Это зеркальный телеобъектив диаметром 500 мм по конструкции известного советского инженера Максутова. ZM-6A был значительно улучшен, это более светосильный объектив (1: 6,3 против 1: 8 у ZM-5A). Он также легче, с многослойным покрытием и имеет встроенную выдвижную бленду. Важное примечание: поскольку объектив имеет огромный вылет на бесконечности, его можно надеть на любую камеру. Буква «А» в названии означает съемный вкладыш. То есть, сняв лайнер, можно надеть другой.Например, Nikon. Буквы «ЗМ» расшифровывали «зеркальный мениск». Основная особенность зеркально-менисковых линз заключается в том, что они дают так называемое «кольцевое» боке, то есть кружок нерезкости в области будет кругом с отверстием в центре.

ZM-6A 6,3 / 500 Описание объектива

• Крепление — Nikon (к объективу прилагается переходник M42-Nikon
).
• Угол обзора — 5 °
• Фокусное расстояние — 500 мм
• Постоянная апертура — 1: 6,3
• Размер рамы — 24х36 мм,
• Масса — 1 шт.4 кг
• Рабочее расстояние — 45,5 мм
• Габаритные размеры — d100x165 мм
• Минимальное расстояние фокусировки — 4,3 м
• Разрешение (центр / край) — 38/22 линий / мм

Объектив ZM-6A 6,3 / 500? Совместим с:

3M-6A (ZM-6A) 500 мм 1: 6.

Большинство моих тестов до сих пор касались широкоугольных, портретных объективов и некоторых стандартов. Теперь я решил сделать несколько снимков своей самой большой моделью: объективом 3М-6А (ЗМ-6А) 500 мм 1: 6,3 М42. Совершенно потрясающий и огромный зеркальный объектив.

3М-6А (ЗМ-6А) 500 мм 1: 6,3 (М42) — зеркальная линза (Максутова) — встроенная бленда.Вы должны потянуть его, чтобы получить доступ к кольцу фокусировки — я считаю, что это отличное решение!

3M-6A (ZM-6A) 500 / 6.3 (M42) по сравнению с:

и Юпитер-37А 135 / 3.5 (М42)

Камера: Olympus E-3
Крепление: M42> Four Thirds
Диафрагма: 6,3
Редактировать: масштабирование PS CS6

3M-6A (ZM-6A) 500 / 6. 3 (модифицированный задний блок объектива)

3M-6A (ZM-6A) 500 / 6,3 (M42) правильный порядок задней линзы линзы.

3M-6A (ZM-6A) 500 / 6. 3 (правильный задний объектив) — взято из того же места, что и выше

3M- 6A (ZM-6A) 500 / 6. 3 (правильный задний объектив)

Если вы хотите его использовать — вам понадобится прочный штатив и / или много света. Было сложно сосредоточиться на моем старом и слабом. Каждое крошечное сотрясение отодвигало объект от кадра!
К счастью, у объектива есть 2 крепления для штатива, каждое с 1/4 дюйма и 3/8 дюйма. Еще одно преимущество — регулируемое крепление M42, фиксируемое 3 винтами. Это дает возможность установить объектив идеально горизонтально / вертикально с любой камерой / адаптером без серьезных изменений.Невероятно важно, когда вы прикрепляете объектив к штативу, а не к камере.

Устройство защиты двигателя Moeller PKZ2 / ZM-6 с ручным управлением

UL / CSA макс. 3 фазы, мощность:		Регулируемый тепловой диапазон (установлен на двигатель FLC)	Диапазон настройки регулируемого магнитные расцепители
л.с. при 230	л.с. @ 460	Термоусилитель	Магнитные усилители
1 1/2	3	4–6	50–80

Позвольте нашим опытным сотрудникам по продажам помочь вам в выборе продуктов, соответствующих вашим потребностям.

© 2016 KMParts.com, Inc. Все права защищены.

% PDF-1.3 % 26 0 объект > эндобдж xref 26 34 0000000016 00000 н. 0000001044 00000 н. 0000001159 00000 н. 0000001298 00000 н. 0000001627 00000 н. 0000002063 00000 н. 0000002187 00000 н. 0000002209 00000 н. 0000002488 00000 н. 0000003482 00000 н. 0000003673 00000 н. 0000003792 00000 н. 0000011277 00000 п. 0000011299 00000 п. 0000018577 00000 п. 0000018599 00000 п. 0000025656 00000 п. 0000025678 00000 п. 0000033259 00000 п. 0000033281 00000 п. 0000040018 00000 п. 0000040040 00000 н. 0000046594 00000 п. 0000046616 00000 п. 0000053789 00000 п. 0000053811 00000 п. 0000060794 00000 п. 0000060817 00000 п. 0000077786 00000 п. 0000077808 00000 п. 0000084438 00000 п. 0000084460 00000 п. 0000001352 00000 н. 0000001606 00000 н. трейлер ] >> startxref 0 %% EOF 27 0 объект > эндобдж 28 0 объект f} # ^! T [Ճ mDv; #) / U ($ + Zb3, y + KRwN) / P -60 >> эндобдж 29 0 объект > эндобдж 58 0 объект > транслировать I} M’SVkuIw3p ؞ Ы! WQ0ce`6 (y [ɒD @ yDPj * ә /! 6NDa \ Es xK 😕 N & * Ill + cLx конечный поток эндобдж 59 0 объект 156 эндобдж 30 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Повернуть 0 / MediaBox [0 0 595 842] / CropBox [0 0 595 842] / PieceInfo N / \\ * H`) >> >> / Большой палец 15 0 R >> эндобдж 31 0 объект > эндобдж 32 0 объект 7407 эндобдж 33 0 объект > эндобдж 34 0 объект [ 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 660 611 333 278 556 556 889 667 222 333 333 389 660 278 333 278 278 556 556 556 556 556 556 556 556 556 556 278 278 660 660 660 500 800 667 667 722 722 611 556 778 722 278 500 667 556 833 722 778 611 778 667 611 556 722 611 889 611 611 611 333 278 333 660 500 333 556 611 556 611 556 278 611 556 222 222 500 222 833 556 556 611 611 333 500 278 556 500 722 500 500 500 333 222 333 660 660 0 0 222 556 389 1000 556 556 333 1000 611 389 1000 0 0 0 0 222 222 389 389 500 500 1000 333 940 500 389 944 0 0 611 278 333 556 556 556 556 222 556 333 800 334 556 660 660 800 333 660 660 660 660 333 556 660 660 660 660 660 556 834 660 834 500 667 667 667 660 667 660 660 722 611 611 611 611 278 278 278 278 722 722 778 778 778 778 778 660 778 722 722 722 722 611 611 500 556 556 556 556 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 660 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ] эндобдж 35 0 объект > эндобдж 36 0 объект > эндобдж 37 0 объект > транслировать HywI ~ 1H @ I [ʂC | +% hxrc3 & j-m ٨0 ى f ^ O {d% pӼ0UU ~ F3J [LbDEHO = L: f_S «} x * DcutXgјP ~~ ԩaO9brq ݽ L (3p] vQMn $ 8e› ؃ evScD & PJmvGì 븆 tФ (Ww5LauN`7ш0cP | б &)] d $ (bE ~ z. i

ZMYND11-MBTD1 индуцирует лейкемогенез за счет захвата комплекса ацетилтрансферазы NuA4 / TIP60 и механизма ассоциации хроматина, опосредованного PWWP. Сегмент кДНК, кодирующий его аминокислоты 1-409 (NM_006624) и сегмент MBTD1 (NM_017643), который содержит небольшую область 5′-UTR непосредственно перед стартовым кодоном (который кодирует 16 аминокислот; см. рис.1a) плюс вся открытая рамка считывания (ORF, аминокислоты 1-628)

Антитела

Антитела, используемые для вестерн-блоттинга (все разведены 1: 2000), включают anti-Flag (M2) -HRP (Sigma, A8592), anti-h4 (CST, 9715), anti-GAPDH (CST, 2118) , анти-β-тубулин (CST, 2146), стрептавидин-HRP (CST, 3999) и анти-GFP (CST, 2956). Антитела, используемые для FACS (все разведены в соотношении 1: 100), включают c-Kit ^APC (Invitrogen, 17-1172-82), c-Kit ^FITC (eBioscience, 11-1171-85), Cd34 ^APC ( eBioscience, 50-0341-82), Cd34 ^FITC (BD, 560238), Mac1 ^APC (BD, 557686), Mac1 ^FITC (eBioscience, 11-0112-85), Gr1 ^FITC (eBioscience, 11-5931-85), Cd4 ^FITC (eBioscience, 11-0042-82), Cd8a ^FITC (eBioscience, 11-0081-82) и Cd19 ^FITC (eBioscience, 11-0193-82). Антитела, используемые в анализах ChIP, ChIP-seq и CUT & RUN, включают анти-Flag (Sigma, F1804), анти-HA (Abcam, ab9110), анти-GFP (Abcam, ab290), анти-h4K36me3 (Abcam, ab9050), анти- h4K27ac (Abcam, ab4729), анти-h4K27me3 (Millipore, 07-449), анти-h5ac (Millipore, 06-866), анти-BRD4 (Bethyl, A301-985A100) и анти-Tip60 (Санта-Крус, sc-166323 ). 10 мкг антител смешивали со 100 мкл Dynabeads для каждого анализа ChIP или ChIP-seq. Все антитела, использованные в анализах CUT & RUN, были разведены 1: 100.

Очистка, размножение и ретровирусная трансдукция первичных мышиных гемопоэтических стволовых клеток / клеток-предшественников (HSPC)

Первичные клон-отрицательные (Lin-) мышиные HSPC были получены путем выделения клеток костного мозга из бедренной и большеберцовой костей мышей BALB / C дикого типа с последующим истощением зрелых гемопоэтических клеток с использованием набора для истощения клональных клеток (Miltenyi Biotec, 130-090-858), как описано ранее ^3,4 . Lin-HSPC затем подвергали цитокиновой стимуляции для размножения ex vivo в среде Opti-MEM с добавлением 15% FBS (Invitrogen, 16000-044), 1% антибиотиков, 50 мкМ β-меркаптоэтанола, 25 нг / мл мышиный SCF (PeproTech, 250-03) и 10 нг / мл мышиного лиганда Flt3 (Sigma, SRP3198). Через 3–4 дня стимуляции проводили спинокуляцию для ретровирусной трансдукции. Вкратце, мышиные HSPC смешивали с концентрированным ретровирусом (Retro-X ™ Concentrator; Takara, 631456) в присутствии 8 мкг / мл полибрена в покрытом фибронектином 6-луночном планшете с последующим центрифугированием при 1500 g в течение 1 часа.Выбор препарата с использованием 2 мкг / мл пуромицина или 500 мкг / мл G418 начался через 2 дня после заражения. Для рутинной жидкой культуры трансдуцированных HSPC мы использовали рецепт самодельной среды, в которой используются культуральные супернатанты линии клеток-продуцентов mSCF (клетки mSCF-CHO, подарок MP Kamps, UCSD) и линии клеток-продуцентов mFlt3l ( SP2.0-mFlt3L клетки, подарок R. Rottapel, University of Toronto) в качестве источника мышиных SCF и Flt3L, соответственно ^5,61,62 .

Сортировка и культивирование мышиных HSC и GMP

Клетки мышиного костного мозга (BM) были выделены из мышей C57BL / 6 путем измельчения бедренных, большеберцовых, тазовых костей и позвоночника с помощью ступки и пестика с последующим магнитным обогащением клеток cKit + BM. с помощью машины autoMACS.Затем клетки cKit + BM окрашивали комбинацией антител, конъюгированных с флуорохромом, и йодида пропидия (PI), окрашивающего жизнеспособность, с последующей сортировкой на HSC (Lin- / cKit + / Sca1 + / Cd16 / 32- / Cd150 + / Cd48-) и GMP ( Lin- / cKit + / Sca1- / Cd16 / 32 + / Cd150−). Чистота отсортированных клеток составила ≥ 95%. Клетки HSC предварительно стимулировали в базовой среде (Opti-MEM, 15% FBS, 1% PS, 50 мкМ β-меркаптоэтанола) с добавлением 20 нг / мл mSCF и 100 нг / мл mTPO в течение 24 ч до инфицирования. GMP-клетки напрямую инфицировали без предварительной стимуляции в той же базовой среде с добавлением 20 нг / мл mSCF и 10 нг / мл mIL3 и mIL6.

Фенотипические анализы гематологических клеток, такие как колониеобразующие единицы (КОЕ), окрашивание по Райту-Гимзе (W&G) и анализ пролиферации

КОЕ проводили с использованием полутвердой среды на основе метилцеллюлозы (STEMCELL Technologies, M3434) в соответствии с протоколу производителя. Вкратце, 8000 свежеинфицированных и выбранных HSPCs были добавлены к полной среде MethoCult в соотношении 1:10 (об. / Об.), Затем помещены в необработанную 35-миллиметровую чашку с использованием иглы с тупым концом, прикрепленной к стерильной шприцем и инкубируют семь дней перед подсчетом.Количество КОЕ подсчитывали вручную с использованием оценочной чашки с сеткой 60 мм и инвертированного микроскопа. После подсчета клетки из колоний собирали для повторного посева путем разбавления полутвердой среды PBS и центрифугирования. Для окрашивания W&G покровное стекло цитоспина, содержащее монослой из 100000 клеток, было последовательно окрашено 100% раствором красителя Райта (Sigma, WS16) в течение двух минут и 10% раствором красителя Гимзы (Sigma, GS500) в течение семи минут перед монтажом и визуализацией. с помощью системы визуализации EVOS XL Core (Invitrogen).Анализы пролиферации HSPC или AML на основе подсчета проводили, как описано ранее ⁶³ .

Иммунофлуоресцентное окрашивание и анализ проточной цитометрии (FACS)

Клетки промывали и суспендировали в буфере для окрашивания FACS (5% FBS в PBS) до конечной плотности 10 миллионов клеток на мл с последующей инкубацией с флуоресцентным светом (либо FITC, либо APC или PE), конъюгированные первичные антитела при разведении 1: 100 в течение 30 минут на льду, промывании буфером для окрашивания FACS и анализе с использованием аппарата Thermo Fisher Attune NxT (доступного в центре UNC Flow Cytometry Core Facility). Единично окрашенные клетки получали в качестве компенсационных контролей, а неокрашенные клетки использовали для установки отрицательного гейта. Данные были проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo.

Лейкемогенный анализ на основе трансплантации костного мозга мышей (BMT)

Все эксперименты на животных были одобрены и проведены в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета Северной Каролины (UNC). Мыши BALB / C были приобретены в лаборатории Джексона и содержались в Центре исследований на животных, входящем в комплексный онкологический центр UNC Lineberger.Мышей содержали в среде, свободной от микробов, с пищей и водопроводной водой ad libitum. КТ и относительная влажность поддерживались на уровне 22 ° C ± 2 ° C и 30–70% соответственно. Автоматическое управление освещением гарантировало 12-часовой цикл свет / темнота (с 7:00 до 19: 00/19: 00 до 7:00). BMT и лейкемогенные анализы in vivo проводили путем инъекции в хвостовую вену 1 миллиона трансдуцированных HSPC сублетально облученным (300 рад) сингенным мышам Balb / c (выполненным UNC Animal Studies Core), как описано ранее ^4,5 . Пересаженных мышей с клиническими признаками лейкемии, такими как сутулость, паралич задних конечностей, плохая подвижность, затрудненное дыхание и спленомегалия, умерщвляли с последующим выделением и патологическим анализом инфильтрирующих бластные ткани тканей, таких как бедренная кость и увеличенная селезенка, с помощью гематоксилина. и окрашивание эозином (H&E) (проведено UNC Histology Research Core).Первичные лейкозные бласты также очищали и вводили вторичным реципиентам. По окончании исследования кровь, взятую из задней полой вены, подвергали полному анализу крови (ОАК) на аппарате Hemavet 950FS (Drew Scientific).

Фракционирование хроматина

Целые клеточные лизаты фракционировали на растворимые (включая цитоплазму и нуклеоплазму) и связанные с хроматином фракции, как описано ранее ⁶⁴ со следующими модификациями. Вкратце, клетки лизировали на льду в течение 20 минут в холодном буфере, содержащем 10 мМ PIPES (pH 7.0), 300 мМ сахарозы, 200 мМ NaCl, 3 мМ MgCl ₂ , 0,5% Triton X-100 и 1 × ингибитор протеазы без ЭДТА (Roche) с последующим центрифугированием при 1300 g в течение 5 минут при 4 ° C, чтобы отделить супернатант от осадка, который представляет растворимую и связанную с хроматином фракции, соответственно. Лизаты, содержащие равное количество клеток, загружали в SDS-PAGE для вестерн-блоттинга. Гистон h4 и антитело к β-тубулину использовали в качестве иммуноблоттинговых контролей для мониторинга чистоты фракционирования.

Коиммунопреципитация (CoIP)

Клетки HEK293T собирали из одной сливной чашки 10 см через 48 часов после трансфекции и лизировали в течение 1 часа при 4 ° C с вращением в 1 мл буфера IP350 (20 мМ Hepes pH 7,9, 350 мМ NaCl, 0,2% NP40, 0,4 мМ ЭДТА, 1,5 мМ MgCl ( ₂ , 10% глицерин), только что добавленные с 1 мМ DTT, смесью ингибиторов протеазы 1X, 1 мМ PMSF и 250 единиц бензоназы (Sigma, E1014), а затем добавление равного объема буфера IP0 (без соли и детергента, все остальное такое же, как у буфера IP350), чтобы снизить концентрацию соли и детергента (буфер IP175: 175 мМ NaCl и 0.1% NP40). Очищенные клеточные лизаты инкубировали с магнитными шариками против FLAG M2 (Sigma, M8823) в течение ночи при 4 ° C с последующей интенсивной промывкой буфером IP175. Связанные белки подвергали анализу вестерн-блоттингом.

Peptide pull-down анализ

Peptide pull-down анализ выполняли, как описано ранее, с небольшими модификациями ^4,65 . Вкратце, биотинилированный гистоновый пептид, который содержит гистон h4.3, аминокислоты 27-46 с ди- или три-метилированным Lys-36 (т.е.е. h4.3K36me2 / 3), инкубировали с агарозой NeutrAvidin (Thermo Fisher, 29204) в буфере PBS в течение 4 часов. Затем пептид-смолу трижды промывали 1 мл промывочного буфера (PBS плюс 0,1% TritonX-100) для удаления несвязавшегося пептида перед инкубацией в течение ночи при 4 ° C с лизатом цельных клеток, полученным из клеток 293T, стабильно экспрессирующих ZM (лизат в последний буфер IP175, как описано выше). После связывания смолу тщательно промывали в буфере IP175 пять раз и анализировали вестерн-блоттингом.

Секвенирование РНК (RNA-seq)

RNA-seq выполняли, как описано ранее ^66,67 . Вкратце, тотальные РНК экстрагировали с помощью набора RNeasy Plus (Qiagen, 74136), а остаточные ДНК удаляли с помощью набора Turbo DNA-free (Thermo Fisher, AM1907), чтобы гарантировать чистоту образца РНК. Библиотеки РНК-seq были созданы с использованием модуля магнитной изоляции мРНК NEBNext Poly (A) (NEB, E7490) и набора для подготовки библиотеки РНК NEBNext Ultra II (NEB, E7770) в соответствии с инструкциями производителя с последующей проверкой качества с помощью системы Agilent TapeStation и глубоким секвенированием. на платформе Illumina Nextseq 500 (доступной в ядрах UNC) с использованием Nextseq 500/550 High Output Kit v2.5 (Illumina, 20024906).

Анализ данных РНК-seq

Файлы fastq были сопоставлены с геномом мыши mm10 (GRCm38.p4) с использованием STAR v2.4.2 со следующими параметрами: –outSAMtype BAM Unsorted –quantMode TranscriptomeSAM ⁶⁸ . Обилие транскриптов для каждого образца оценивали с помощью лосося v0.1.19 для количественной оценки транскриптома, определенного аннотацией гена Gencode ⁶⁹ . Подсчеты уровней генов были суммированы по изоформам, и гены с низкой экспрессией (все образцы имели менее 10 считываний) были удалены перед последующим анализом. DESeq2 использовали для тестирования дифференциально экспрессируемых генов (DEG) между разными образцами, как описано ранее ^66,70 . Тепловые карты экспрессии генов были сгенерированы с использованием TPM (транскриптов на миллион), преобразованного в среднее значение log2, отсортированных в порядке убывания на основе значений их экспрессии в ZM-иммортализованных ячейках AML и пакета R «gplots» v3.0.3 либо без кластеризации, либо с иерархической кластеризацией столбцов по средняя навеска. Графики вулканов, визуализирующие DEG, были созданы с использованием пакета R «EnhancedVolcano» v 3.11 с указанными фильтрами. Функциональная аннотация DEG была сделана с использованием веб-программного обеспечения: База данных для аннотаций, визуализации и интегрированного обнаружения (DAVID) v6.8 ⁷¹ .

Идентификация Lin-Sca1 + c-Kit + (LSK) мышиных гематопоэтических стволовых клеток сигнатура гена стволовости

DESeq2 использовался для идентификации дифференциально экспрессируемых генов между примитивными клетками LSK и каждым из набора зрелых / дифференцированных типов гематологических клеток ( включая В-клетки, CD4T, CD8T, моноциты, макрофаги, эритроциты и нейтрофилы) с использованием опубликованного набора данных RNA-seq ⁷² . Гены, которые обычно активируются в клетках LSK по сравнению со всеми зрелыми клетками, с отсечкой Log2FC более 1 и скорректированным значением p менее 0,01, были выбраны в качестве генов «стволовости» LSK (всего 922 гена). Уникальное обогащение определенных 922 генов «стволовости» LSK самообновляющимися гемопоэтическими стволовыми клетками было подтверждено анализом обогащения набора генов (GSEA) с использованием различных опубликованных наборов данных RNA-seq и индивидуального набора генов ^73,74 .

Иммунопреципитация хроматина (ChIP) с последующим глубоким секвенированием (ChIP-seq)

Независимо полученные ZM-установленные клетки AML использовали для ChIP-seq, как описано ранее ⁶⁶ .Вкратце, клетки фиксировали в PBS, содержащем 1% формальдегид (Thermo Scientific, 28908), в течение 10 минут, а затем гасили добавлением 125 мМ глицина в течение 5 минут. Фиксированные клетки сначала лизировали в буфере LB1 (50 мМ HEPES-KOH pH 7,5, 140 мМ NaCl, 1 мМ EDTA, 10% глицерин, 0,5% NP-40, 0,25% TritonX-100) и промывали в буфере LB2 (10 мМ Трис-HCl pH 8,0, 200 мМ NaCl, 1 мМ EDTA, 0,5 мМ EGTA) для очистки ядер, которые затем лизировали в буфере LB3 (10 мМ Tris-HCl pH 8,0, 100 мМ NaCl, 1 мМ EDTA, 0,5 мМ EGTA, 0. 1% дезоксихолата натрия, 0,5% N лауроилсаркозина) и обработали ультразвуком с помощью ультразвукового устройства Bioruptor (Diagenode, B01020001; при настройке высокой энергии на 60 циклов с 30 с включенным и 30 с выключенным). После обработки ультразвуком добавляли 1% TritonX-100 для солюбилизации ядерной мембраны перед центрифугированием (20 000 g в течение 10 мин при 4 ° C). Затем супернатант инкубировали со связанными с антителами динабусами (Invitrogen, 11204D) в течение ночи при 4 ° C. После последовательных промывок описанными ранее буферами (т.е. буфером с низким содержанием соли, буфером с высоким содержанием соли, буфером LiCl и буфером TE) комплексы ДНК-белок были элюированы и подверглись обратному сшиванию, РНКазе (Roche, 11119915001) и протеазе. K (Roche, 03115828001) и выделение ДНК с помощью набора для очистки Qiagen PCR (Qiagen, 28106).Библиотеки ChIP-seq получали с использованием набора для подготовки библиотеки ДНК NEBNext Ultra II (NEB, E7645L) в соответствии с протоколом производителя. Библиотеки ChIP-seq секвенировали на секвенсоре Illumina Nextseq 500 с использованием набора Nextseq 500/550 High Output Kit v2.5.

Анализ данных ChIP-seq

Считывания ChIP-seq были сопоставлены с геномом мыши (мм10) с использованием BWA (v0.7.15) ⁷⁵ . После удаления считываний с показателем карты <20 пики были вызваны программным обеспечением MACS2 (v2.1.1) ⁷⁶ с использованием ввода в качестве элементов управления и опции (-q 0.1 −m 20100). Пики ZM, содержащиеся в образцах ChIP-seq, меченных как GFP, так и HA, считались общими пиками ZM. Широкие пики для h4K27me3 и h4K36me3 были определены с использованием метода скользящего окна для обнаружения областей с более чем на 2 сигнала в ChIP, чем во входной выборке, как описано ранее ³ . Пики ChIP-seq были связаны с генами (кодирующими и некодирующими) в этом порядке — обозначены как «проксимальный промотор» (± 2,5 т.п.н. от сайта начала транскрипции (TSS)), «тело гена», «дистальный промотор» (-50 кб до -2. От 5 т.п.н. TSS и от +2,5 т.п.н. до +5 т.п.н. концов транскрипции, исключая концы в «теле гена»), и в остальном «межгенные» с минимальным перекрытием в 1 п.н. Плотности чтения ChIP-seq вокруг сайтов начала транскрипции были рассчитаны и кластеризованы с использованием программы seqMINER (v1.3.4) ⁷⁷ . Чтобы определить перекрытие любых двух списков пиков, мы сначала объединили два списка для создания дискретного списка пиков без перекрытия, а затем вычислили его перекрытие с каждым из двух исходных списков. Таким образом, указанные числа на диаграммах Венна могут не соответствовать общему количеству пиков в отдельных списках.Deeptools использовались для генерации важных файлов с нормализованным охватом фрагментов ChIP и тепловых карт, показывающих сигналы ChIP вдоль единицы транскрипции с параметрами (computeMatrix scale-region -b 3000 -a 3000 –regionBodyLength 5000 –skipZeros –sortUsing median) ⁷⁸ . Мы выполнили двухэтапную нормализацию при генерации файла покрытия bigwig из файла выравнивания BAM — количество чтений на интервал сначала было нормализовано до 1x покрытия генома (чтения на покрытие генома, RPGC), а затем нормализовано для ввода путем вычитания с использованием deepTools bamCoverage и bigwigCompare функции соответственно. Инструмент Genomic Regions Enrichment of Annotations Tool (GREAT) ⁷⁹ был использован для определения расширенных функций генов, а Integrative Genomics Viewer (IGV) был использован для отображения RPGC и нормализованных по входу сигналов ChIP-seq (формат bigwig).

CUT & RUN

Расщепление под мишенями и высвобождение с использованием нуклеазы (CUT & RUN) выполняли в соответствии с протоколом EpiCypher CUTANA CUTANA CUT & RUN. Вкратце, один миллион живых клеток был собран, промыт и повторно суспендирован в промывочном буфере (20 мМ HEPES, pH 7.5, 150 мМ NaCl, 0,5 мМ спермидина и 1x полный ингибитор протеазы Roche) с последующей инкубацией при комнатной температуре в течение 10 мин с активированными магнитными шариками ConA (Bangs Laboratories, номер по каталогу BP531), которые были промыты и повторно суспендированы в буфере активации шариков ( 20 мМ HEPES, pH 7,9, 10 мМ KCl, 1 мМ CaCl ( ₂ , 1 мМ MnCl ( ₂ )). После связывания с активированными шариками клетки пермеабилизировали в буфере для антител (промывочный буфер + 0,01% дигитонин + 2 мМ EDTA) и инкубировали с антителом HA или Flag (разведение 1: 100) на нутаторе в течение ночи при 4 ° C. На следующий день суспензию клеточных гранул дважды промывали холодным дигитониновым буфером (промывочный буфер + 0,01% дигитонин), а затем инкубировали с pAG-MNase (разведение 1:20, EpiCypher, каталожный номер 15-1116) в течение 10 минут при температуре RT с последующими двумя промываниями холодным дигитониновым буфером. Затем MNase активировали добавлением CaCl2 для расщепления целевого хроматина в течение 2 часов при 4 ° C. После расщепления хроматина активность МНКазы прекращали и фрагменты хроматина высвобождались в супернатант путем добавления стоп-буфера (340 мМ NaCl, 20 мМ ЭДТА, 4 мМ EGTA, 50 мкг / мл РНКазы A и 50 мкг / мл гликогена) и инкубации при 37 °. C в течение 10 мин.ДНК очищали из собранного супернатанта с использованием набора для очистки ДНК NEB Monarch (NEB, каталожный № T1030) в соответствии с инструкциями производителя. Наконец, 5-10 нг очищенной ДНК, обогащенной CUT & RUN, использовали для приготовления библиотеки Illumina с использованием набора для подготовки библиотеки ДНК NEB Ultra II в соответствии с инструкциями производителя.

Анализ данных CUT & RUN

Необработанные показания секвенирования были сначала обрезаны с помощью Trim Galore для удаления низкокачественных и адаптерных оснований, а затем выровнены по hg19 с помощью STAR. После сопоставления считываний с геномом были извлечены только первичные выравнивания с последующим удалением повторяющихся считываний с помощью инструмента Picard MarkDuplicates.Файл покрытия bigwig был сгенерирован из файла выравнивания BAM с использованием функции deeptools bamCoverage, а количество чтений на бункер было нормализовано до 1x покрытия генома (чтения на покрытие генома, RPGC). Кластерная корреляционная тепловая карта была построена с использованием функции deepTools plotCorrelation, а коэффициенты корреляции были рассчитаны методом Пирсона.

Секвенирование всего экзома и анализ данных

Геномная ДНК ZM-индуцированных первичных опухолей, полученная из костного мозга лейкемических мышей и с последующим быстрым отбором пуромицина для обогащения ZM-экспрессирующих лейкозных бластов, была выделена с использованием мини-набора PureLink Genomic DNA Mini Kit (Invitrogen, номер в каталоге K182002). Геномная ДНК ZM-инфицированных HSPC, которые использовались при трансплантации костного мозга для индукции AML у мышей, использовалась в качестве контроля для выявления потенциальных спонтанных мутаций, приобретенных в ходе развития AML in vivo. Подготовка библиотеки, секвенирование и анализ данных были выполнены компанией Novogen. Вкратце, библиотеки для секвенирования были созданы с использованием набора Agilent SureSelectXT Mouse All Exon. После 100-кратного секвенирования всего экзома использовали BWA для сопоставления чистых считываний парных концов с эталонным геномом mm10 мыши.SNP и InDel были обнаружены и отфильтрованы (общее количество ≥ 10) с использованием программного обеспечения GATK. Инструменты muTect и Strelka использовались для вызова соматических SNP и InDels в образцах опухолей соответственно. Варианты были аннотированы ANNOVAR.

Количественные RT-qPCR и ChIP-qPCR

RT-qPCR и ChIP-qPCR проводили, как описано ранее ^3,66 . Вкратце, экстрагированные тотальные РНК были преобразованы в кДНК с помощью набора для синтеза кДНК iScript (Bio-Rad, 1708890). Количественную ПЦР проводили в трех повторностях с использованием iTaq Universal SYBR Green Supermix (Bio-Rad, 1725124) на системе быстрой ПЦР в реальном времени ABI 7900HT.Сигнал qPCR сначала нормализовали до 18S рибосомной РНК (в RT-qPCR) или входной ДНК (в ChIP-qPCR) для нормализации входных данных, после чего следовала вторая нормализация для контрольной клетки для вычисления относительных сигналов. Подробные последовательности праймеров представлены в дополнительных данных 6.

BioID

HSPC, стабильно экспрессирующие BirA-меченный ZM, обрабатывали 50 мкМ биотина в течение 24 часов, чтобы обеспечить биотинилирование ZM-взаимодействующих белков в зависимости от близости с последующим лизисом. в буфере RIPA (10% глицерин, 25 мМ Tris-HCl pH 8, 150 мМ NaCl, 2 мМ EDTA, 0.1% SDS, 1% NP-40, 0,2% дезоксихолата натрия) со свежими добавками 1X коктейль ингибиторов протеазы, 1 мМ PMSF и 250 единиц бензоназы в течение 1 ч с вращением при 4 ° C. После центрифугирования на максимальной скорости в течение 30 мин при 4 ° C очищенный супернатант инкубировали с шариками нейтравидина (Thermo Fisher, 29204) в течение ночи при 4 ° C. Гранулы последовательно промывали 1 мл буфера RIPA, буфера для лизиса TAP (10% глицерин, 150 мМ NaCl, 2 мМ EDTA, 0,1% NP-40, 50 мМ HEPES pH 8) и буфером ABC (50 мМ бикарбоната аммония, pH 8) с последующим масс-спектрометрическим анализом.

Идентификация белков на основе масс-спектрометрии

Белки элюировали с гранул путем нагревания при 95 ° C в течение 5 минут в 100 мкл 1x буфера Лэммли (Boston Bioproducts) с последующим разделением в 4–12% геле Bis-Tris Deep Well и визуализация окрашиванием Кумасси. Затем каждую полосу геля собирали и разрезали на 12 срезов геля равного объема, которые подвергали расщеплению трипсином в геле, как описано перед ⁸⁰ . Вкратце, сначала обесцвечивали сегменты геля (в 50 мМ буфере бикарбоната аммония с 50% метанолом), затем следовало восстановление (в 10 мМ TCEP), алкилирование (в 50 мМ йодацетамида), дегидратация (в ацетонитриле) и, наконец, расщепление при 37 °. C в течение 12–16 ч в 50 мМ буфере бикарбоната аммония, содержащем 100 нг модифицированного трипсина для свиней (Promega), пригодного для секвенирования. Затем триптические пептидные продукты подкисляли (в 0,1% муравьиной кислоте) и разделяли на проточной колонке 150 × 0,075 мм, загруженной 2,5 мкм смолой XSelect CSH C18 (Waters) с обращенной фазой, с использованием системы nanoAcquity UPLC (Waters). Элюированные пептиды ионизировали электрораспылением (2,15 кВ) и анализировали с помощью масс-спектрометра Orbitrap Fusion Tribrid (Thermo) с данными МС и данными МС / МС, полученными с помощью FTMS (режим профиля; с разрешением 240000 и диапазоном от 375 до 1500 мкм). / z) и ионной ловушкой (режим центроида; с нормальным диапазоном масс и нормированной энергией столкновения, зависящей от массы предшественника, между 28.0 и 31.0) анализатор соответственно.

Анализ протеомных данных

Белки были идентифицированы путем поиска в базе данных UniProtKB, ограниченной Mus musculus с использованием Mascot (Matrix Science) с толерантностью к исходным ионам 3 ppm и толерантностью к ионам фрагментов 0,5 Да, фиксированными модификациями для карбамидометила цистеина и различные модификации для окисления метионина и ацетила на N-конце. Каркас (программное обеспечение Proteome) использовали для проверки идентификации пептидов и белков на основе МС / МС.Идентификация пептидов принималась, если они могли быть установлены с менее чем 1,0% ложного обнаружения алгоритмом Scaffold Local FDR. Идентификация белков принималась, если они могли быть установлены с ошибкой менее 1,0% и содержали по крайней мере 2 идентифицированных пептида. Вероятности белков были присвоены алгоритмом Protein Prophet ⁸¹ . Белки были отфильтрованы, если у них было спектральное число <8, по крайней мере, в одной группе образцов, и подсчеты были нормализованы до значений нормализованного коэффициента спектрального изобилия (NSAF) log2 ⁸² .Значимые взаимодействующие белки были идентифицированы по log2-кратному изменению> 4.

Обработка соединением

Th2834 (Axon, каталожный № 2339) или I-BET151 (Selleckchem) растворяли в ДМСО и использовали для исследований обработки клеток. Для проведения исследований лечения лейкозных мышей (обычно через семь дней после ТКМ) I-BET151 сначала растворяли в ДМСО, чтобы получить исходный раствор 120 мг / мл, а затем разбавляли до 6 мг / мл путем смешивания 50 мкл раствора. запас I-BET151 с 950 мкл раствора носителя (20% Kolliphor HS 15 [об. / об.] в 0.9% NaCl; Сигма, 42966). I-BET151 или контрольный образец носителя вводили внутрибрюшинно (i.p.) в суточной дозе 30 мг / кг массы тела в течение трех недель (инъекции 5 дней в неделю).

Статистика и воспроизводимость

Данные в столбчатых и линейных диаграммах представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов, если не указано иное. Статистический анализ проводился с помощью двустороннего критерия t Стьюдента для сравнения двух наборов данных с предполагаемым нормальным распределением. Мы использовали двусторонний лог-ранговый тест для кривых выживаемости Каплана-Мейера для определения статистической значимости.Значение p менее 0,05 считалось значимым. Уровни статистической значимости обозначены следующим образом: * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001; **** п <0,0001. Никакие статистические методы не использовались для предварительного определения размера выборки. Все данные репрезентативных экспериментов (такие как изображение вестерн-блоттинга и другие микрофотографии) были повторены два-три раза независимо друг от друга с аналогичными результатами.

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Связующая энергия | Физика

Цели обучения

К концу этого раздела вы сможете:

• Определите и обсудите энергию связи.
• Рассчитайте энергию связи на нуклон частицы.

Чем сильнее связана система, тем сильнее силы, удерживающие ее вместе, и тем больше энергии требуется для ее разрыва. Таким образом, мы можем узнать о ядерных силах, исследуя, насколько сильно связаны ядра.Мы определяем энергии связи (BE) ядра как энергии, необходимой для полного разложения его на отдельные протоны и нейтроны . Мы можем определить БЭ ядра по его массе покоя. Они связаны известным соотношением Эйнштейна E = (Δ m ) c ² . Связанная система имеет на меньшую массу, чем ее отдельные составляющие; чем прочнее связаны нуклоны, тем меньше масса ядра.

Представьте, что нуклид разрывается на части, как показано на рисунке 1. Работа, проделанная для преодоления ядерных сил, удерживающих ядро ​​вместе, вводит энергию в систему. По определению, подводимая энергия равна энергии связи BE. При разделении части находятся в состоянии покоя, поэтому вложенная в них энергия увеличивает их общую массу покоя по сравнению с той, какой она была, когда они были склеены вместе в качестве ядра. Таким образом, это увеличение массы составляет Δ м = BE / c ² . Эта разница в массе известна как дефект массы .Это означает, что масса ядра меньше суммы масс составляющих его протонов и нейтронов. Нуклид ^A X имеет Z протонов и N нейтронов, так что разница в массе составляет ∆ m = ( Zm _p + Nm _n ) — m _to . Таким образом, BE = (∆ m ) c ² = [( Zm _p + Nm _n ) — m _tot ]

c , где m _tot — масса нуклида ^A X, m _p — масса протона, а m _n — масса протона. нейтрон.Традиционно мы имеем дело с массами нейтральных атомов. Чтобы получить атомные массы в последнем уравнении, мы сначала добавляем Z электронов к m _to , что дает m ( ^A X), атомную массу нуклида. Затем мы добавляем Z электронов к Z протонам, что дает Zm ( ¹ H), или Z раз больше массы атома водорода. Таким образом, энергия связи нуклида ^A X равна BE = {[ Zm ( ¹ H) + Nm _n ] — m ( ^A X)} c ² .

Рис. 1. Работа, проделанная для разрыва ядра на составляющие его протоны и нейтроны, увеличивает массу системы. Работа по разборке ядра равна его энергии связи BE. Связанная система имеет меньшую массу, чем сумма ее частей, особенно это заметно в ядрах, где силы и энергии очень велики.

Атомные массы можно найти в Приложении A, наиболее удобно выраженные в унифицированных атомных единицах массы u (1 u = 931,5 МэВ / c ² ).Таким образом, BE рассчитывается на основе известных атомных масс.

Большое и маленькое

Ядерный распад помогает объяснить горячие недра Земли

Загадка, созданная методом радиоактивного датирования горных пород, решается за счет радиоактивного нагрева недр Земли. Эта интригующая история — еще один пример того, как физика малого масштаба может объяснить крупномасштабные явления.

Радиоактивное датирование играет роль в определении приблизительного возраста Земли. Самые старые породы на Земле затвердели около 3 лет. 5 × 10 ⁹ лет назад — число, определенное датированием по урану-238. Эти породы могли затвердеть только после того, как поверхность Земли достаточно остыла. Температуру Земли при формировании можно оценить на основе гравитационной потенциальной энергии сборки частей, преобразующейся в тепловую энергию. Используя концепции теплопередачи, обсуждаемые в термодинамике, можно затем рассчитать, сколько времени потребуется, чтобы поверхность остыла до температур горных пород. Результат составляет около 10 ⁹ лет.Первые сформированные породы были твердыми в течение 3,5 × 10 ⁹ лет, так что возраст Земли составляет приблизительно 4,5 × 10 ⁹ года. Существует множество других типов свидетельств (используются характеристики как Земли, так и Солнечной системы), подтверждающих эту эпоху. Загадка в том, что, учитывая его возраст и начальную температуру, центр Земли должен быть намного холоднее, чем сегодня (см. Рис. 2).

Рис. 2. Центр Земли охлаждается известными методами теплопередачи. Конвекция в жидких областях и теплопроводность перемещают тепловую энергию к поверхности, откуда она излучается в холодное темное пространство. Учитывая возраст Земли и ее начальную температуру, к настоящему времени она должна была остыть до более низкой температуры. Взрыв показывает, что ядерный распад высвобождает энергию внутри Земли. Эта энергия замедляет процесс охлаждения и отвечает за то, что внутреннее пространство все еще остается расплавленным.

По сейсмическим волнам, вызванным землетрясениями, мы знаем, что внутренние части Земли жидкие.Сдвиговые или поперечные волны не могут проходить через жидкость и не передаются через ядро ​​Земли. Тем не менее, сжатие или продольные волны могут проходить через жидкость и проходить через ядро. По этой информации можно оценить температуру в салоне. Как было замечено, внутренняя часть должна была охладиться больше от своей начальной температуры за 4,5 × 10 ⁹ лет с момента ее образования. На самом деле, чтобы остыть до нынешней температуры, потребовалось не более 10 90 483 9 90 484 лет. Что держит его горячим? Ответ, по-видимому, заключается в радиоактивном распаде первичных элементов, которые были частью материала, сформировавшего Землю (см. Увеличенное изображение на Рисунке 2).

Нуклиды, такие как ²³⁸ U и ⁴⁰ K, имеют период полураспада, равный возрасту Земли или превышающий его, и их распад по-прежнему дает энергию во внутреннюю часть. Некоторые из первичных радиоактивных нуклидов имеют нестабильные продукты распада, которые также выделяют энергию — ²³⁸ U имеет длинную цепочку распада.Кроме того, в начале жизни Земли было больше этих первичных радиоактивных нуклидов, и поэтому их активность и энергия были больше (возможно, на порядок). Количество энергии, создаваемой этими распадами на кубический метр, очень мало. Однако, поскольку огромный объем материала лежит глубоко под поверхностью, это относительно небольшое количество энергии не может быстро уйти. Энергия, вырабатываемая вблизи поверхности, имеет гораздо меньшее расстояние, на которое можно уйти, и оказывает незначительное влияние на температуру поверхности.

Заслуживает упоминания последний эффект этого захваченного излучения. При альфа-распаде образуются ядра гелия, которые при остановке образуют атомы гелия и захватывают электроны. Большая часть гелия на Земле добывается из скважин. Любой гелий в атмосфере улетучится в геологически короткие сроки из-за его высокой тепловой скорости.

Какие закономерности и идеи можно получить при изучении энергии связи различных нуклидов? Во-первых, мы обнаруживаем, что BE примерно пропорционален количеству нуклонов A в любом ядре.Примерно вдвое больше энергии требуется для разрыва ядра, такого как ²⁴ Mg, по сравнению, например, с разрывом ¹² C. Чтобы помочь нам взглянуть на другие эффекты, мы разделим BE на A и рассмотрим энергию связи на нуклон , BE / A . График BE / A на рисунке 3 показывает некоторые очень интересные аспекты ядер. Мы видим, что энергия связи на нуклон в среднем составляет около 8 МэВ, но она ниже как для самых легких, так и для самых тяжелых ядер. Эта общая тенденция, при которой ядра с A , равным примерно 60, имеют наибольшее значение BE / A и, таким образом, являются наиболее тесно связанными, обусловлена ​​комбинированными характеристиками ядерных сил притяжения и кулоновской силы отталкивания. Особенно важно отметить две вещи: сильное ядерное взаимодействие примерно в 100 раз сильнее кулоновской силы, и ядерные силы короче по радиусу действия по сравнению с кулоновской силой. Таким образом, для ядер с малой массой преобладает ядерное притяжение, и каждый добавленный нуклон образует связи со всеми остальными, в результате чего все более тяжелые ядра имеют все более высокие значения BE / A .Это продолжается до A ≈ 60, что примерно соответствует массовому числу железа. Кроме того, новые нуклоны, добавленные к ядру, будут слишком далеко от других, чтобы почувствовать их ядерное притяжение. Добавленные протоны, однако, ощущают отталкивание всех остальных протонов, поскольку кулоновская сила имеет больший радиус действия. Кулоновское отталкивание растет для все более тяжелых ядер, но ядерное притяжение остается примерно таким же, и поэтому BE / A становится меньше. Вот почему стабильные ядра тяжелее A ≈ 40 имеют больше нейтронов, чем протонов.Кулоновское отталкивание уменьшается за счет большего количества нейтронов, чтобы держать протоны дальше друг от друга (см. Рисунок 4).

Рис. 3. График средней энергии связи на нуклон BE / A для стабильных ядер. Наиболее сильно связанные ядра — это ядра с A около 60, где сила притяжения имеет наибольшее влияние. При более высоких значениях A и s кулоновское отталкивание постепенно снижает энергию связи на нуклон, поскольку ядерная сила является короткодействующей. Пики на кривой — это очень плотно связанные нуклиды и указывают на закрытие оболочки.

Рис. 4. Ядерная сила притягивает и сильнее кулоновской силы, но имеет короткую дальность действия. В ядрах малой массы каждый нуклон ощущает ядерное притяжение всех остальных. В более крупных ядрах диапазон ядерных сил, показанный для одного нуклона, меньше размера ядра, но кулоновское отталкивание от всех протонов достигает всех остальных. Если ядро ​​достаточно велико, кулоновское отталкивание может добавить, чтобы преодолеть ядерное притяжение.

Есть несколько заметных всплесков на графике BE / A , которые представляют особенно сильно связанные ядра.Эти всплески раскрывают дополнительные детали ядерных сил, такие как подтверждение того, что ядра с закрытой оболочкой (с магическим числом протонов или нейтронов, или и тем и другим) более тесно связаны. Пики также указывают на то, что некоторые ядра с четными номерами для Z и N , а также с Z = N исключительно тесно связаны. Это открытие можно коррелировать с некоторыми из космических распространений элементов.

Наиболее распространенными элементами во Вселенной, согласно наблюдениям атомных спектров из космоса, являются водород, за ним следует ⁴ He, с гораздо меньшими количествами ¹² C и другие элементы. Следует отметить, что более тяжелые элементы образуются при взрывах сверхновых, а более легкие — в результате ядерного синтеза во время нормальных жизненных циклов звезд, как будет обсуждаться в следующих главах. Наиболее распространенные элементы имеют наиболее прочно связанные ядра. Не случайно также одним из наиболее прочно связанных легких ядер является ⁴ He, испускаемое при распаде α .

Пример 1. Что такое BE / A для альфа-частицы?

Рассчитайте энергию связи на нуклон ⁴ He, α частицы.

Стратегия

Чтобы найти BE / A , мы сначала находим BE с помощью уравнения

BE = {[ Zm ( ¹ H) + Nm _n ] — m ( ^A X)} c ²

, а затем разделите на A . Это просто, если мы найдем соответствующие атомные массы в Приложении A.

Решение

Энергия связи ядра определяется уравнением

BE = {[ Zm ( ¹ H) + Nm _n ] — m ( ^A X)} c ² .

Для ⁴ He, имеем

Z = N = 2; таким образом, BE = {[2 m ( ¹ H) +2 m _n ] — m ( ⁴ He)} c ² .

Приложение A дает эти массы как m ( ⁴ He) = 4,002602 u, m ( ¹ H) = 1,007825 u и m _n = 1,008665 u. Таким образом,

BE = (0,030378 u) c ² .

Учитывая, что 1 u = 931,5 МэВ / c ² , находим

BE = (0,030378) (931,5 МэВ / c ² ) c ² = 28,3 МэВ.

Поскольку A = 4, мы видим, что BE / A — это число, деленное на 4, или

BE / A = 7,07 МэВ / нуклон.

Обсуждение

Это большая энергия связи на нуклон по сравнению с другими ядрами с малой массой, у которых BE / A ≈ 3 МэВ / нуклон. Это указывает на то, что ⁴ He сильно связан по сравнению со своими соседями на диаграмме нуклидов. Вы можете увидеть пик, представляющий это значение BE / A для ⁴ He на графике на рисунке 3. Вот почему ⁴ He является стабильным. Поскольку ⁴ He тесно связан, он имеет меньшую массу, чем другие ядра A = 4, и, следовательно, не может спонтанно распадаться на них. Большая энергия связи также помогает объяснить, почему некоторые ядра распадаются на α .Меньшая масса продуктов распада может означать выделение энергии, и такие распады могут быть спонтанными. Кроме того, может случиться так, что два протона и два нейтрона в ядре могут случайно оказаться вместе, испытать исключительно большую ядерную силу, связывающую эту комбинацию, и действовать как элемент ⁴ He внутри ядра, по крайней мере, какое-то время. В некоторых случаях ⁴ He ускользает, и затем происходит распад α .

Об энергиях связи ядер можно узнать больше. Общая тенденция в BE / A имеет фундаментальное значение для производства энергии в звездах и, например, для источников энергии синтеза и деления на Земле. Это одно из приложений ядерной физики, рассматриваемое в Медицинских приложениях ядерной физики. Обилие элементов на Земле, в звездах и во Вселенной в целом связано с энергией связи ядер и имеет значение для продолжающегося расширения Вселенной.

Стратегии решения проблем

Для расчетов энергии реакции и связи и расчетов активности в ядерной физике

1. Определите, что именно необходимо определить в проблеме (определите неизвестные) .Это позволит вам решить, участвует ли энергия распада или ядерной реакции, например, или проблема в первую очередь связана с активностью (скоростью распада).
2. Составьте список того, что дано или может быть выведено из указанной проблемы (укажите известные).
3. Для задач реакции и энергии связи мы используем атомные, а не ядерные массы. Поскольку используются массы нейтральных атомов, вы должны подсчитать количество вовлеченных электронов.Если они не уравновешиваются (например, при распаде β ⁺ ), то необходимо произвести корректировку энергии на 0,511 МэВ на электрон. Также обратите внимание, что атомные массы не могут быть заданы в задаче; их можно найти в таблицах.
4. Для задач, связанных с активностью, связь активности с периодом полураспада и количество ядер, указанное в уравнении [латекс] R = \ frac {0,693N} {t_ {1/2}} \\ [/ latex ] может быть очень полезным. Поскольку здесь задействовано количество ядер, вам также необходимо знать моли и число Авогадро.
5. Выполните требуемый расчет; внимательно отслеживайте знаки плюс и минус, а также степень 10.
6. Проверьте ответ, чтобы узнать, разумен ли он: имеет ли он смысл? Сравните ваши результаты с проработанными примерами и другой информацией в тексте. (Принятие во внимание рекомендаций на шаге 5 также поможет вам быть уверенным в своем результате. ) Вы должны концептуально понять проблему, чтобы иметь возможность определить, является ли числовой результат разумным.

Исследования PhET: ядерное деление

Начать цепную реакцию или ввести нерадиоактивные изотопы, чтобы предотвратить ее.Контролируйте производство энергии в ядерном реакторе! Щелкните изображение, чтобы загрузить симуляцию.

Щелкните, чтобы загрузить симуляцию. Запускать на Java.

Сводка раздела

• Энергия связи (BE) ядра — это энергия, необходимая для разделения его на отдельные протоны и нейтроны. В терминах атомных масс BE = {[ Zm ( ¹ H) + Nm _n ] — м ( ^A X)} c ² , где m ( ¹ H) — масса атома водорода, m ( ^A X) — атомная масса нуклида и m _n — масса нейтрона.Характер энергии связи на нуклон BE / A раскрывает детали ядерной силы. Чем больше BE / A , тем стабильнее ядро.

Концептуальные вопросы

1. Почему количество нейтронов больше, чем количество протонов в стабильных ядрах, имеющих [латекс] A [/ латекс] больше примерно 40, и почему этот эффект более выражен для самых тяжелых ядер?

Задачи и упражнения

1. ² H — слабосвязанный изотоп водорода.Называемый дейтерием или тяжелым водородом, он стабилен, но относительно редко — это 0,015% природного водорода. Обратите внимание, что у дейтерия Z = N , что должно сделать его более тесно связанным, но оба числа нечетные. Вычислите BE / A , энергию связи на нуклон, для ² H и сравните ее с приблизительным значением, полученным из графика на рисунке 3.
2. ⁵⁶ Fe — один из наиболее прочно связанных нуклидов. Это более 90% природного железа.Обратите внимание, что ⁵⁶ Fe имеет четное число как протонов, так и нейтронов. Вычислите BE / A , энергию связи на нуклон, для ⁵⁶ Fe и сравните ее с приблизительным значением, полученным из графика на рисунке 3.
3. ²⁰⁹ Bi — самый тяжелый стабильный нуклид, а его BE / A имеет низкий уровень по сравнению с нуклидами средней массы. Вычислите BE / A , энергию связи на нуклон, для ²⁰⁹ Bi и сравните ее с приблизительным значением, полученным из графика в [ссылка].
4. (a) Рассчитайте BE / A для ²³⁵ U, более редкого из двух наиболее распространенных изотопов урана. (b) Рассчитайте BE / A для ²³⁸ U. (Большая часть урана составляет ²³⁸ U.) Обратите внимание, что ²³⁸ U имеет четное число как протонов, так и нейтронов. Существенно ли отличается BE / A из ²³⁸ U от ²³⁵ U?
5. (a) Рассчитайте BE / A для ¹² C. Стабильный и относительно прочно связанный, этот нуклид состоит в основном из природного углерода. (b) Вычислите BE / A для ¹⁴ C. Является ли разница в BE / A между ¹² C и ¹⁴ C значительной? Один стабильный и распространенный, а другой нестабильный и редкий.
6. Тот факт, что BE / A является наибольшим для A около 60, означает, что радиус действия ядерной силы примерно равен диаметру таких нуклидов. (а) Рассчитайте диаметр ядра A = 60. (b) Сравните BE / A для ⁵⁸ Ni и ⁹⁰ Sr.Первый — один из наиболее прочно связанных нуклидов, а второй — более крупный и менее связанный.
7. Цель этой задачи — показать тремя способами, что энергия связи электрона в атоме водорода ничтожна по сравнению с массами протона и электрона. (a) Вычислите массовый эквивалент энергии связи 13,6 эВ электрона в атоме водорода и сравните его с массой атома водорода, полученной из Приложения A. (b) Вычтите массу протона, указанную в Таблица 1 в Субструктуре ядра по массе атома водорода, приведенной в Приложении А. Вы обнаружите, что разница равна массе электрона с точностью до трех цифр, что означает, что энергия связи мала по сравнению. (c) Возьмите отношение энергии связи электрона (13,6 эВ) к энергетическому эквиваленту массы электрона (0,511 МэВ). (г) Обсудите, как ваши ответы подтверждают заявленную цель этой проблемы.
8. Необоснованные результаты. Физик элементарных частиц обнаруживает нейтральную частицу с массой 2,02733 u, которая, как он предполагает, представляет собой два связанных вместе нейтрона.(а) Найдите энергию связи. б) Что неразумного в этом результате? (c) Какие предположения необоснованны или непоследовательны?

Глоссарий

энергия связи: энергия, необходимая для разделения ядра на отдельные протоны и нейтроны

энергия связи на нуклон: энергия связи, рассчитанная на нуклон; он раскрывает детали ядерной силы — чем больше BE / A , тем стабильнее ядро ​​

Избранные решения проблем и упражнения

1. 1,112 МэВ, в соответствии с графиком

3. 7,848 МэВ, в соответствии с графиком

5. (а) 7,680 МэВ, согласно графику; (б) 7,520 МэВ, согласно графику. Несущественно отличается от значения для ¹² C, но достаточно ниже, чтобы позволить распад на другой нуклид, который более прочно связан

7. (а) 1.46 × 10 ⁻⁸ u против 1.007825 u для ¹ H; (б) 0,000549 ед .; (в) 2.66 × 10 ⁻⁵

8. (а) -9,315 МэВ; (б) отрицательная энергия связи подразумевает несвязанную систему; (c) Это предположение, что это два связанных нейтрона, неверно.

Erreur | Rexel France

 Veuillez sélectionner au moins un chantier pour continer

{{еще}} {{if true &&! empty projectsData.worksites && projectsData.status eq ‘success’}}

 Veuillez sélectionner un chantier pour continue.

Sélectionner un chantier pour appliquer les associées {{если projectsData.maxWorksites! = null}} Vous pouvez séléctionner jusqu’à {{: projectsData. maxWorksites}} читатель (и) {{/если}}

{{: projectsData.worksites.length}} chantier (s) Trouvé (s)

chantier (s) труве (s)

Voir le détail | Masquer

{{! — Состояние потребления CLOUD-36019 с датой окончания при отступлении -}}

Условия chantier

Срок действия dans

Консоммация

{{для projectsData.рабочие места}} {{для проектов}} {{! — Состояние потребления CLOUD-36019 с датой окончания при отступлении -}}

{{:кодовое название}}

Срок действия дана: {{:истекает}} {{if expiresIn> 1}} журналы {{/если}} {{if expiresIn == 1}} Jour {{/если}}

Завершение:

{{если! isApplicableAmountLimit}}

Pas de montant макс.

{{еще}} {{/если}} {{/для}}

---

{{/для}}

Vous devez séléctionner au moins une condition chantier

Sauvegarder

{{/если}} {{if false &&! empty projectsData.result && projectsData.status eq ‘success’}} {{если ложь}}

Séléctionner au moins une condition chantier

{{/если}} {{для projectsData.

Зм 6а: Доступ ограничен: проблема с IP