Глаза для фш: Наборы кистей для Фотошопа: глаза

Ретушь глаз в Photoshop — Fototips.ru

Несколько простых способов ретуши глаз в Photoshop, которые сделаю глаза модели более выразительными и устранят мелкие недостатки, если таковые имеются.

Думаю, нет нужды объяснять, что центром внимания практически любого портрета являются глаза. Именно с ними мы сегодня и будем работать.

Размер и форма глаз

Изменить размер глаз модели можно с помощью инструмента Free Transform. Естественно, следует помнить, что такое вмешательство существенно изменит внешность, а это может понравиться не всем. Однако, если вам нравятся большие глаза, приступим.

Исходное фото:

Глаза мы будем увеличивать по одному. Для начала выделим глаз с помощью инструмента Lasso Tool (L). Лучше взять область с запасом и обязательно включить в выделение бровь!

Нажав Ctrl+J, мы создаем новый слой, содержащий только выделенную область. Теперь с помощью сочетания клавиш Ctrl+T переходим в режим свободного трансформирования.



Лучше не растягивать глаз мышкой, а ввести на панели вверху процент, на который мы хотим увеличить выделенную область:



Обычно достаточно увеличения на 5—7 процентов (в данном случае мы введём большой процент для наглядности). Запомните введённое значение, чтобы позднее применить его ко второму глазу.

Теперь создаём маску и с помощью черной кисти с нулевой жесткостью (Hardness: 0%) обрабатываем края увеличенной зоны, стирая появившиеся границы.

Проверить отсутствие жёстких границ можно, выключив отображение исходного слоя. При этом слой с увеличенным глазом будет выглядеть так:


Сливаем слои с помощью клавиш Ctrl+E и повторяем всю последовательность со вторым глазом. 

Используя свободное трансформирование, можно не только увеличить размер, но также слегка раздвинуть слишком близко посаженные глаза (для аккуратного перемещения трансформируемой области лучше всего использовать стрелки на клавиатуре). Кроме того, в некоторых случаях можно слегка изменить наклон глаз, чтобы чуть-чуть приподнять опущенные уголки.

Осветление белка и удаление красных прожилок

Если в глазах видны красные сосуды или другие ненужные нам прожилки, сначала следует убрать их. Кстати, именно вопрос об удалении этих прожилок чаще всего задают начинающие ретушёры. Однако, должен вас разочаровать, идеального решения не существует. Как нет и никакой хитрости, позволяющей сразу же получить превосходный результат — всё дело исключительно в аккуратности и кропотливости процесса.

Тем не менее, в сети можно найти описания множества методов быстрой борьбы с прожилками в глазах. Например, некоторые авторы рекомендуют с помощью пипетки брать образец цвета глазного белка рядом с прожилкой, а затем в новом слое закрашивать её кистью с небольшим (20-30%) значением Opacity. После чего рекомендуется добавление шума с помощью фильтра Filter => Noise => Add Noise (чаще всего рекомендуют параметры Amount: 1%, Distribution: Uniform, Monochromatic). Ещё одна популярная рекомендация сводится к обесцвечиванию красного с последующей манипуляцией с масками.

Вы можете попробовать эти методы самостоятельно, я же не буду останавливаться на них подробнее и иллюстрировать их, поскольку считаю неэффективными.

Если не прибегать к так называемому методу частотного разложения, который мы не будем рассматривать в этом цикле статей, лучше всего не пытаться искать панацею, а бороться с прожилками, вооружившись обычным Spot Healing Brush Tool. Надеюсь, алгоритм использования этого инструмента не нуждается в каких-либо дополнительных комментариях. Всё, что от вас потребуется, — это аккуратность, которую я уже упоминал выше.

Разобравшись с прожилками, перейдём к осветлению. Осветлить сам белок можно множеством способов. Главное — не перестараться, чтобы не сделать его неестественно белым, а также не убить на нём тень, создающую объём. В противном случае глаз будет выглядеть как плоская пластина, вставленная в глазницу.

В данном случае мы продублируем слой клавишами Ctrl+J и выберем для него режим наложения Screen (в случае с изначально светлыми глазами можете поэкспериментировать с режимами Soft Light и Hard Light).

Теперь закроем этот слой чёрной маской (удерживаем клавишу Alt при её создании), возьмём нежёсткую белую кисть и осветлим весь глаз (вместе с радужкой). Мы рекомендуем параметры кисти: Opacity 15%, Flow 50%.

Радужка

Чтобы повысить контраст на радужке и сделать глаз более «живым», мы будем использовать инструменты Dodge и Burn. Оба они хороши тем, что имеют параметр Range, позволяющий применять их только к светлым, тёмным или средним тонам на фотографии.

Итак, выберем инструмент Dodge Tool (O) и установим для него параметр Range в значение Highlight. Таким образом, мы будем осветлять только самые светлые участки. Значение Exposure достаточно 5—7%.



Установив небольшую жёсткость (Hardness), пройдёмся по радужке, не боясь залезать на зрачок — его инструмент не затронет. Если в глазу виден блик, можно его дополнительно усилить.

Осветлив светлое, перейдём к затемнению тёмного. Выбираем инструмент Burn Tool и устанавливаем Range: Shadows. Значение Exposure оставим в районе 5%.



Снова пройдёмся по радужке. Обратите внимание на зрачок: при затемнении этим методом он становится больше, что выглядит привлекательнее. Кроме того, взяв кисть небольшого диаметра, можно усилить тёмный ободок по контуру радужки (или нарисовать его, если он изначально отсутствовал). Это придаст глазам б

ольшую глубину.

Имейте в виду, что за исключением случаев обработки очень светлых глаз, крайне важно соблюдать именно такую последовательность: сначала Dodge, затем Burn! В противном случае, если вы начнёте с затемнения, все тончайшие светлые прожилки в радужке просто исчезнут и уже не вернутся при осветлении.

Изменение цвета глаз в Photoshop

Эта, пожалуй, одна из самых популярных манипуляций в Adobe Photoshop, выполняется очень просто. Нам потребуется создать новый чистый слой (Ctrl+Shift+N) и выбрать для него режим наложения Color.



Теперь надо выбрать тот цвет, в который мы будем перекрашивать наши глаза. Чаще всего требуется не изменять цвет радикально, а лишь слегка скорректировать или усилить оттенок (например, сделать серые глаза голубыми). В этих случаях можно выбрать пипетку (Eyedropper Tool (I)) и взять исходный цвет глаза в качестве отправного. Затем в окне Color Picker меняем цвет на более насыщенный:



Не выбирайте слишком светлые и слишком насыщенные цвета — они будут выглядеть неестественно. Так, например, для голубых и зелёных глаз мы рекомендуем выбирать цвет в этих областях:





Выбрав цвет, мы берём обычную кисть — Brush Tool (B) и буквально закрашиваем ей радужку. Затем снижаем прозрачность слоя, добиваясь нужной нам степени натуральности.

Если оттенок не полностью вас удовлетворяет, вы можете изменить его с помощью инструмента Hue/Saturation (Ctrl+U)



Не забывайте, что описанным методом мы изменяем только оттенок глаз. Сделать глаза более тёмными или светлыми, если вам это требуется, необходимо до того, как вы перейдете к раскрашиванию.

И сравнение с тем, что у нас было в самом начале:

Другие мои статьи про обработку:

Как увеличить глаза в Фотошопе

Многие думают, что «пластическая операция» лица на фото под силу только профессионалам. На самом деле в Фотошоп сделать большие глаза не так уж и сложно. Этому вы и научитесь, ознакомившись с данным уроком. Наберитесь терпения и будьте внимательны к мелочам, и тогда вы сможете изменить человека на фото до неузнаваемости. Результаты могут получиться довольно интересными.

Вы узнаете о двух способах. Какой из них выбрать, будет зависеть от исходного фото. Советуем для начала использовать снимок анфас, лучше без наклона головы. Глаза и брови должны быть хорошо видны и не закрываться волосами или очками. Когда вы немного потренируетесь, вы сможете редактировать и более сложные фото.

Как увеличить глаза в Фотошопе

Способ 1: простой

Он подойдет, если вы собираетесь увеличивать глаза вместе с бровями.

Если же брови трогать не хотите, лучше воспользоваться вторым способом.

Будем увеличивать глаза модели на фото, используйте окошко «Навигация», с помощью него удобно перемещать изображение и менять его размер:

• Открываем фото и палитру слоёв.
• Делаем дубликат основного слоя. Для этого в окне «Слои» нажмите правую кнопку мыши и «Сделать дубликат слоя», можно сделать это через верхнее меню, но окошко нам все равно понадобится.

• В палитре «Слои» поставьте «Непрозрачность» дубликата примерно на 50% и оставайтесь на нем.
• Выбираем в панели инструментов слева «Прямоугольная выделенная область» и выделяем глаза вместе с бровями. Не страшно, если в прямоугольник попадают волосы и фрагменты лица.

• В верхнем меню выбираем «Редактирование» и «Свободное трансформирование»

• Увеличиваем выделенную область с помощью стрелок, которые появятся при наведении мыши на края. Аккуратно увеличиваем прямоугольник сверху и с боков.

Вот и ответ на вопрос, как увеличить глаза в Фотошопе. Но чтобы все смотрелось естественно, важно не перестараться: следите, чтобы глаза и брови не оказались за пределами лица, а зрачки оставались круглыми и не растянулись бы в ширину или по высоте. Для этого мы и сделали новый слой прозрачным – так можно видеть оригинал фото, чтобы соблюдать пропорции и симметрию.

В более сложных случаях (когда на исходном фото глаза несимметричны при определенном наклоне головы) можно использовать вместо опции «Свободное трансформирование» «Искажение» или «Деформация». Эти инструменты находятся в меню «Редактирование», далее «Трансформирование». Но ими пользоваться сложнее.

• После того как вы сделали в Фотошоп увеличение глаз, нажмите в верхнем меню справа галочку.
• Увеличьте непрозрачность слоя до 100%.
• В верхнем меню «Выделение» нажмите «Отменить выделение».
• Выберите в панели инструментов слева «Ластик» (обычный) и аккуратно удалите лишние области вокруг глаз. Если вы случайно стерли больше чем нужно, нажмите «Редактирование» и «Шаг назад»:

• Если изначально вокруг глаз были дефекты (например: мешки, синяки или морщинки), которые теперь увеличились, их можно убрать. Для этого используйте инструмент «Точечная восстанавливающая кисть» с настройками: режим – нормальный (или «Осветление», если нужно убрать синяки), тип – «С учетом содержимого», размер зависит от фото. Пройдитесь по коже вокруг глаз, и она будет выглядеть лучше.

Способ 2

Если вы хотите сделать большие глаза в Фотошоп, но брови оставить на месте, то делается это немного иначе. Операция в принципе похожа, только выделять нужно одни глаза. Для этого можно использовать инструмент «Перо».

• Сделайте дубликат основного слоя.
• Обведите точками поочередно оба глаза вместе с ресницами, мимическими морщинками и тенями. При создании контура последнюю точку нужно соединить с первой. Затем нажмите правую кнопку мышки и «Образовать выделенную область».
• Выберите в верхнем меню «Редактирование» и «Свободное трансформирование» или «Искажение»:

• Увеличьте глаза таким же образом как в способе 1,

• Уберите лишнее с помощью ластика и отредактируйте, если нужно, инструментом «Точечная восстанавливающая кисть».

Вот, что получилось:

Таким же способом можно не только увеличить глаза, но и, например, губы. А на вопрос, как уменьшить нос в Фотошопе, ответ такой же – подойдет та же операция, только технически это немного сложнее, нужна сноровка.

На рисунке ниже вы видите фотомонтаж:

Мы изменили внешность актрисы Кирстен Данст (да простит она нас), увеличив глаза и уменьшив нос. На фото справа ее сложно узнать, это практически другой человек.

Ссылка на источник

Как увеличить глаза в Photoshop

Кликаем по фоновому слою в панели слоёв для его активации и таким же образом создаём выделение второго глаза, а затем нажимаем Ctrl+J для копирования на новый слой:

Визуально рабочий документ не изменился, но слои в панели слоёв теперь выглядят так:

А теперь начнётся самое интересное, мы будем увеличивать глаза по отдельности.

Сейчас у нас активен средний слой, на котором находится вырезанный правый глаз.
Нажимаем клавиши Ctrl+T для активации «Свободного трансформирования», вокруг глаза появляется габаритная рамка. Одновременно зажмите клавиши Shift и Alt, чтобы трансформация шла от центра и соблюдались пропорции, и потяните какой-нибудь из уголков рамки во внешнем направлении от центра рамки. Немного увеличьте рамку, отпустите клавишу мыши и только потом отпустите клавиши Shift и Alt:

Обратите внимание, вверху, на панели параметров, будет указан процент трансформации ширины и высоты, запомните какой-либо из них, например, у меня ширина составляет 106,99% от исходной. Запомните этот параметр!

Теперь переходим на слой с другим глазом и повторяем эту же процедуру так, чтобы ширина составляла такое же значение от исходной (у меня это 106,99%).

Вот что получилось у меня:

Как Вы видите, местами, например, слева, появились тональные переходы.

Сейчас мы займёмся их исправлением, но сперва давайте сдвинем глаза на немного к носу. Возьмите инструмент «Перемещение» (Move Tool) и клавишами «стрелка вправо» и «стрелка влево» выполните эти действия. Каждое нажатие на клавишу (при активном «Перемещении») перемещает изображение на 1 пиксель, величина перемещения зависит от размера фотографии, у меня хватило 3 пикселя.

Теперь убираем переходы. Применяем слой-маску к верхнему слою, берём круглую чёрную кисть с нулевой жёсткостью, диаметр кисти устанавливаем примерно равный диаметру радужки, и начинаем затирать края изображения на слое:

Как видите, я убрал артефакт справа. Таким же образом убираем и остальные переходы на этом и другом глазу (также с помощью слой-маски).

Ну вот, собственно, и всё, фотография готова, как будто бы и никаких изменений, но девушка стала гораздо эффектнее, не так ли:

Надеюсь, урок по увеличению глаз в Photoshop был не сложный и Вам понравился )))

Кисть для фотошопа — Глаза / Creativo.one

Доступ
к PREMIUM-контенту

89 видеоуроков только для PREMIUM-пользователей. Коллекция пополняется несколько раз в месяц!

Обратная связь
от PRO

При добавлении работы на портал вы сможете получить обратную связь от нашего эксперта — Елены Минаковой.

Доступ к закрытым
трансляциям

Для участников PREMIUM регулярно проводятся закрытые трансляции с профессионалами. Остальным они доступны только за деньги.

Отсутствие
рекламы

PREMIUM-пользователи не видят рекламных объявлений и баннеров.

Приоритетная
проверка работ

Все работы, которые вы добавляете в портфолио, рассматриваются в приоритетном порядке.

Статистика
переходов в соцсети

Вы будете видеть, сколько человек перешли по ссылкам соцсетей из вашего профиля.

Возможность
скачивать видеоуроки

Вы сможете скачивать видеоуроки без ограничений.

PREMIUM-статус
на аватаре

На вашей аватарке будет отображаться значок, обозначающий Premium-статус.

Короткая именная
ссылка на профиль

Получите именную ссылку на профиль вида https://creativo.one/sasha

Возможность отложенной
публикации постов

Вы сами решаете, в какое время пост появится в ленте.

Светлая / темная
тема сайта

Меняйте тему оформления сайта под свое настроение.

Расширенные возможности опросов

Возможность устраивать голосование с прогрессивным рейтингом. Возможность создавать викторины (скоро).

Как выделить глаза в Фотошопе

При редактировании фотографий в Фотошопе не самую последнюю роль играет выделение глаз модели. Именно глаза могут стать наиболее ярким элементом композиции.

Этот урок посвятим тому, как выделить глаза на снимке, используя редактор Фотошоп.

Выделение глаз

Разделим работу над глазами на три этапа:

1. Осветление и контраст.
2. Усиление текстуры и резкости.
3. Добавление объема.

Осветляем радужку

Для того, чтобы начать работу с радужной оболочкой, ее необходимо отделить от основного изображения и скопировать на новый слой. Сделать это можно любым удобным способом.

Урок: Как вырезать объект в Фотошопе

1. Для осветления радужки поменяем режим наложения для слоя с вырезанными глазами на «Экран» или на любой другой из данной группы. Все зависит от исходного изображения – чем темнее исходник, тем более сильное воздействие можно осуществить.

2. Применяем к слою маску белого цвета.

3. Активируем кисточку.

   На верхней панели параметров выбираем инструмент с жесткостью 0%, а непрозрачность настраиваем на 30%. Цвет кисти черный.

4. Оставаясь на маске, аккуратно прокрашиваем границу радужки, стирая часть слоя по контуру. В результате у нас должен получиться темный ободок.

5. Для повышения контрастности применим корректирующий слой «Уровни».

   Крайними движками регулируем насыщенность тени и светимость светлых участков.

   Для того чтобы «Уровни» применились только к глазам, активируем кнопку «привязки».

Палитра слоев после осветления должна выглядеть следующим образом:

Текстура и резкость

Для продолжения работы нам понадобится сделать копию всех видимых слоев сочетанием клавиш CTRL+ALT+SHIFT+E. Копию назовем «Осветление».

1. Кликаем по миниатюре слоя со скопированной радужкой с зажатой клавишей CTRL, загружая выделенную область.

2. Копируем выделение на новый слой горячими клавишами CTRL+J.

3. Далее усилим текстуру при помощи фильтра «Мозаичный узор», который находится в разделе «Текстура» соответствующего меню.

4. С настройкой фильтра придется немного повозиться, поскольку каждая картинка уникальна. Посмотрите на скриншот для того, чтобы понять, какой должен получиться результат.

5. Сменим режим смешивания для слоя с примененным фильтром на «Мягкий свет» и понизим непрозрачность для более естественного эффекта.

6. Снова создадим объединенную копию (CTRL+ALT+SHIFT+E) и назовем ее «Текстура».

7. Загружаем выделенную область, кликнув с зажатым CTRL по любому слою с вырезанной радужкой.

8. Снова производим копирование выделения на новый слой.

9. Резкость будем наводить при помощи фильтра под названием «Цветовой контраст». Для этого откроем меню «Фильтр» и перейдем в блок «Другое».

10. Значение радиуса делаем таким, чтобы максимально выделить самые мелкие детали.

11. Переходим в палитру слоев и меняем режим наложения на «Мягкий свет» либо «Перекрытие», все зависит от резкости исходного изображения.

Объем

Для придания взгляду дополнительного объема воспользуемся техникой dodge-n-burn. С ее помощью мы можем вручную высветлить или затемнить нужные участки.

1. Снова делаем копию всех слоев и называем ее «Резкость». Затем создаем новый слой.

2. В меню «Редактирование» ищем пункт «Выполнить заливку».

3. После активирования опции откроется окно настройки с названием «Заполнить». Здесь, в блоке «Содержимое» выбираем «50% серого» и жмем ОК.

4. Полученный слой нужно скопировать (CTRL+J). Получим вот такой вид палитры:

   Верхний слой назовем «Тень», а нижний – «Свет».

   Заключительным шагом подготовки будет смена режима наложения каждого слоя на «Мягкий свет».

5. Находим на левой панели инструмент под названием «Осветлитель».

   В настройках указываем диапазон «Светлые тона», экспонирование — 30%.

6. Квадратными скобками подбираем диаметр инструмента, примерно равный радужке, и 1 – 2 раза проходимся по светлым участкам снимка на слое «Свет». Это весь глаз целиком. Диаметром поменьше осветляем уголки и нижние части век. Не перестарайтесь.

7. Затем берем инструмент «Затемнитель» с такими же настройками.

8. На этот раз области воздействия такие: ресницы на нижнем веке, участок, на котором находится бровь и ресницы верхнего века. Брови и ресницы можно подчеркнуть сильнее, то есть, прокрасить большее количество раз. Активный слой – «Тень».

Посмотрим, что было до обработки, и какого результата удалось добиться:

Приемы, изученные в этом уроке, помогут Вам эффективно и довольно быстро выделять глаза на фотографиях в Фотошопе.

При обработке радужной оболочки в частности и глаз в целом, важно помнить о том, что естественность ценится выше, чем яркие цвета или гипертрофированная резкость, поэтому будьте сдержанны и аккуратны при редактировании фотографий.

Мы рады, что смогли помочь Вам в решении проблемы.
Опишите, что у вас не получилось. Наши специалисты постараются ответить максимально быстро.

Помогла ли вам эта статья?

ДА НЕТ

Удаление эффекта красных глаз в Adobe Photoshop

2 — 2011

Софья Скрылина, преподаватель информационных технологий, г.Санкт-Петербург

При недостаточном освещении в момент съемки очень часто приходится использовать вспышку. Если объектами съемки являются люди или животные, то в темноте их зрачки расширяются и отражают вспышку фотоаппарата. Появившееся отражение называется эффектом красных глаз. Более того, помимо красных могут возникать зеленые, синие или белые блики. При коррекции данного эффекта необходимо помнить следующее: появившийся блик отражает зрачок глаза, а зрачок должен быть черного или темного цвета. Поэтому в ходе коррекции требуется заменить светлые пикселы блика (красные, зеленые, синие или белые) на темные или черные пикселы зрачка. В данной статье мы рассмотрим различный инструментарий программы Photoshop для удаления эффекта красных глаз в зависимости от цвета возникшего блика.

Первые инструменты из программы Photoshop, приходящие на ум, которые можно использовать для коррекции, — это Карандаш (Pencil) и Кисть (Brush). Ими можно просто закрасить блик. Но для устранения эффекта красных глаз они не слишком подходят, потому что осуществляют довольно грубую замену — зрачок кажется нарисованным и неестественным. Лучше применять другие инструменты.

Удаление красного блика

Для удаления красного блика используется инструмент Красные глаза (Red Eye), который активируется клавишей «J» или многократным нажатием комбинации клавиш Shift+J в случае выбора другого инструмента из группы.

Панель свойств данного инструмента содержит всего два параметра:

• Размер зрачка (Pupil Size) — определяет размер области, которую будет обрабатывать инструмент;
• в текстовом поле Величина затемнения (Darken Amount) настраивается уровень затемнения красного пятна.

Для применения инструмента необходимо просто щелкнуть по пятну. Если не удалось добиться требуемого эффекта, нужно отменить коррекцию и произвести щелчок с другими настройками. На рис. 1 представлен результат использования данного инструмента со следующими настройками:

• Размер зрачка (Pupil Size) — 80%;
• Величина затемнения (Darken Amount) — 30%.

Рис. 1. Исходное изображение девушки с красными бликами в глазах (слева) и результат применения инструмента Красные глаза

Удаление синего или зеленого блика

Если цвет отражения от вспышки отличен от красного, то инструмент Красные глаза (Red Eye) не сработает. Вместо него необходимо использовать инструменты Губка (Sponge) и Затемнитель (Burn), которые находятся в одной группе и вызываются клавишей «O». Для перехода между ними применяется комбинация клавиш Shift+O. Первым инструментом блик обесцвечивается, а вторым — затемняется.

Данные инструменты работают по одному принципу: чем больше инструмент применяется, то есть чем чаще вы отпускаете и нажимаете кнопку мыши, тем сильнее выражается его действие. Если за одно нажатие мыши вы не достигли требуемого результата, пройдитесь по этому месту еще раз.

Для обесцвечивания цветного блика в настройках инструмента Губка (Sponge) необходимо установить режим Снизить насыщенность (Desaturate). Интенсивность действия инструмента, задаваемую параметром Нажим (Flow), можно оставить заданной по умолчанию 100%. Обработку зрачка лучше выполнять при увеличенном масштабе, установив предварительно размер кисти. На рис. 2а представлено исходное изображение кошки, снятое с помощью вспышки. Как видите, блик получился зеленого цвета.

a b c

Рис. 2. Изображение кошки: а — исходное, с зелеными бликами в глазах; б — после применения инструмента Губка, в — после использования инструмента Затемнитель

На рис. 2б показан результат обработки зрачков инструментом Губка (Sponge), выполнялась двукратная обработка.

По причине того, что зрачки получились серого цвета, в настройках инструмента Затемнитель (Burn) необходимо указать область действия инструмента Средние тона (Midtones), выбрав этот пункт из списка Диапазон (Range) на панели свойств инструмента. Остальные параметры можно оставить заданными по умолчанию. На рис. 2в представлен результат трехкратной обработки зрачков данным инструментом.

Удаление белого или очень яркого блика

Для удаления белого блика необходимо уменьшить его яркость. Инструмент Затемнитель (Burn) в данном случае не поможет — величина яркости очень велика для него. Воспользуйтесь диалоговым окном Цветовой тон/Насыщенность (Hue/Saturation), которое вызывается комбинацией клавиш Ctrl+U (в Mac OS — Command+U).

Примечание. Данное окно является универсальным инструментом для устранения эффекта красных глаз. Им можно пользоваться для удаления как красного или зеленого, так и белого блика.

На рис. 3а приведен пример изображения кошек с очень яркими зрачками желтого цвета.

a

b

Рис. 3. Исходное изображение кошек с очень яркими бликами в глазах (а) и результат выделения зрачков и модификации границ областей выделения (б)

Перед использованием вышеупомянутого окна необходимо выделить зрачки. Для этого можно воспользоваться, например, прямолинейным лассо. Чтобы смягчить границы области выделения, следует растушевать их в окне растушевки хотя бы на 1 пиксел. Данное окно вызывается комбинацией клавиш Shift+F6. Но в этом случае после затемнения вдоль контура зрачка возникнет светлая граница. Поэтому перед применением инструмента цветокоррекции область выделения также необходимо увеличить на 1 пиксел, выполнив команду Выделение (Select) -> Модификация (Modify) -> Расширить (Extract). Результат показан на рис. 3б.

В диалоговом окне Цветовой тон/Насыщенность (Hue/Saturation) необходимо сместить влево два ползунка — Насыщенность (Saturation) и Яркость (Lightness). Для первого параметра следует задать минимальное значение, сместив ползунок в крайнее левое положение, а значение второго параметра определяется опытным путем (рис. 4). Например, для зрачков кошки, которая находится слева, использовалось значение – 80, а для кошки справа было задано значение –70 (рис. 5а).

Рис. 4. Настройки диалогового окна Цветовой тон/Насыщенность

В случае с кошкой, расположенной справа, блик получился настолько ярким, что отражение от вспышки вышло за пределы зрачка и попало на верхнюю часть радужной оболочки. Этот дефект легко удаляется штампом или восстанавливающей кистью. Итоговое изображение приведено на рис. 5б.

a

b

Рис. 5. Результат применения диалогового окна Цветовой тон/Насыщенность (а) и итоговый результат удаления ярких бликов (б)

Не забывайте, что помимо инструментов Photoshop можно осуществлять настройку фотокамеры на автоматическое удаление эффекта красных глаз в момент съемки. В этом случае цветных бликов будет возникать гораздо меньше, что избавит вас от коррекции значительной части создаваемых снимков. 

КомпьюАрт 2’2011

Красивые глаза в фотошопе | Уроки Фотошопа (Photoshop)

В сегодняшнем уроке я расскажу, как сделать красивые глаза в фотошопе. Урок совсем не сложный, а глаза становятся просто фантастическими 🙂

Результат будет выглядеть так:

Красивые глаза в фотошопе

1. Найдите любую фотографию глаз. Я взял такую:

Для начала поиграем с цветами глаз. Для удобства выделите радужную оболочку глаз любым удобным вам способом. Я сделал это при помощи Elliptical Marquee Tool (Эллипс) и Polygonal Lasso Tool (Полигональное лассо) в режиме вычитания:

2. Создайте новый слой (сочетание клавиш Shift+Ctrl+N) и закрасьте выделение любым цветом:

Режим смешивания Soft Light (мягкий свет), непрозрачность 80%:

Красивые глаза сейчас выглядят так:

Неплохо, правда? Но мы же хотим большего 😉

3. Удалите созданный слой с цветовой заливкой. Он был для нас пробой пера и наглядно показал, как сменить цвет глаз в фотошопе. Теперь скопируйте область в выделении на новый слой (горячая клавиша Ctrl+J) и установите режим смешивания Overlay (Перекрытие). Глаз стал «глубже»:

4. Перейдите на слой ниже, туда, где находится исходное изображение глаза. Возьмите Dodge Tool (Осветлитель) и пройдитесь по радужке мягкой кистью небольшого диаметра. Этим вы добавите глазу фантастичности и яркости:

5. Загрузите выделение глаза (Ctrl+клик по миниатюре слоя). Создайте новый слой и поверх всех и залейте его радужным градиентом в режиме Angle (Конус):

А теперь, как вы вероятно уже догадались, мы применим отработанный приём с изменением цвета глаз. Поменяйте режим смешивания на Soft Light (Мягкий свет), установите непрозрачность 70% и наслаждайтесь видом красивого глаза:

Если убрать слой с повторным наложением глаза (там где режим смешивания Overlay), то результат будет выглядеть так:

Тут уж на любителя. В принципе, это всё, что я хотел вам рассказать по поводу создания красивых глаз в фотошопе. Дальше вступают в дело ваша фантазия и творческий подход 😉 Вы можете наносить любые изображения на радужную оболочку глаза, имитировать глаз любого животного и многое другое.

На этом всё, урок фотошопа по созданию красивых глаз закончен. Выкладывайте свои работы в комментариях 🙂 А я прощаюсь с вами до новых встреч.

FSH мышечная дистрофия | Johns Hopkins Medicine

Что такое мышечная дистрофия ФСГ?

Лицево-плечевой (ФСГ) мышечная дистрофия — это форма мышечной дистрофии, которая чаще всего вызывает прогрессирующую слабость лица, плеч и плеч, хотя симптомы могут поражать и ноги.

Заболевание вызывается дегенерацией мышц из-за отсутствия хромосомы в генах человека. Это удаление может передаваться от одного поколения к другому.

Симптомы мышечной дистрофии ФСГ

Симптомы у разных людей различаются и могут включать признаки слабости лица, такие как трудности с закрытием глаз, улыбка или питье через трубочку.

Когда симптомы мышечной дистрофии ФСГ появляются в детстве, состояние с большей вероятностью прогрессирует до сильной слабости лица и конечностей. В других случаях, когда начало происходит в подростковом или взрослом возрасте, симптомы с большей вероятностью будут развиваться медленно и постепенно.

Диагностика мышечной дистрофии ФСГ

Диагноз мышечной дистрофии ФСГ основывается на истории болезни, семейном анамнезе, физическом осмотре и генетических исследованиях.

Врачи часто могут подтвердить диагноз с помощью анализа крови, который показывает делецию хромосомы, вызывающую мышечную дистрофию ФСГ. Консультант по генетике внимательно изучит анамнез человека и разъяснит принципы наследования и то, как они влияют на риск мышечной дистрофии ФСГ. Эта информация может помочь отдельным лицам и семьям взвесить риски и потенциальные преимущества генетического тестирования и решить, подходит ли оно им.

Если у человека есть признаки и симптомы, не типичные для мышечной дистрофии ФСГ, невролог может порекомендовать другие лабораторные исследования, такие как электродиагностическое тестирование (ЭМГ) или биопсия мышц, чтобы исключить другие состояния, прежде чем рекомендовать генетическое тестирование.

Биопсия мышцы часто помогает определить, вызвана ли мышечная слабость мышечной дистрофией, наследственным заболеванием или другими приобретенными причинами дегенерации мышц, такими как воспаление или токсическое воздействие.

Лечение мышечной дистрофии ФСГ

Лечение мышечной дистрофии ФСГ наиболее эффективно, если оно проводится многопрофильной командой.

Невролог наблюдает за лечением и направляет лечение. Специалисты по реабилитационной медицине могут встретиться с людьми, чтобы предложить индивидуальные программы упражнений и растяжки для лечения слабости и контрактур.

Команда также оценит, может ли человек получить пользу от шин и ортезов для улучшения функции рук или ног.

Люди с мышечной дистрофией ФСГ могут иметь потерю слуха или васкулопатию сетчатки — состояние, которое поражает кровеносные сосуды глаза. Врач проведет обследование на наличие этих связанных расстройств и при необходимости направит пациента к дополнительным специалистам.

Дополнительная информация о мышечной дистрофии ФСГ

Прочтите о других типах нервно-мышечных заболеваний в Библиотеке здоровья

Тест на фолликулостимулирующий гормон и ФСГ

Этот тест проверяет, сколько «ФСГ» (фолликулостимулирующий гормон) содержится в вашей крови или моче.Недостаточно диагностировать заболевание, и вы, вероятно, будете одновременно сдавать анализы крови на другие гормоны, если ваш врач сочтет, что они вам нужны.

Гормон — это химическое вещество, которое вырабатывает ваше тело, которое контролирует орган или определенные вещи, которые делает ваше тело. ФСГ — один из гормонов, участвующих в воспроизводстве.

Этот гормон вырабатывается как мужчинами, так и женщинами. Это помогает женщинам высвобождать свои яйцеклетки, а мужчинам — производить сперму. Недостаток этого гормона может затруднить беременность.Или его слишком много может вызвать ту же проблему.

Гипофиз, расположенный чуть ниже мозга, вырабатывает ФСГ и выпускает его в кровоток.

Почему вы можете получить это

Ваш врач может предложить этот тест по следующим причинам:

• Проблемы с беременностью.
• Нерегулярные периоды. У женщин менструальный цикл прекратился или не наступает, когда должен.
• Менопауза. Тест на ФСГ может помочь диагностировать, когда у женщины естественным образом прекращаются месячные, что обычно происходит после 45 лет.
• Низкое количество сперматозоидов. Это также может включать такие симптомы, как снижение полового влечения или мышечная масса.
• Раннее или позднее половое созревание. Для детей, у которых половое созревание начинается раньше или позже обычного, гормональный тест является одним из способов определить, есть ли более серьезная проблема, связанная с гипоталамусом (область мозга, контролирующая гипофиз), самим гипофизом, яичниками, яичками или другими частями. вашего тела.
• Заболевания гипофиза или гипоталамуса. Проблемы здесь могут повлиять на то, сколько ФСГ вырабатывается в вашем организме.Другие симптомы включают усталость, потерю веса и снижение аппетита.

Что включает в себя тест

Вам не нужно делать ничего особенного, чтобы подготовиться к этому тесту.

Ваш врач может проверить уровень ФСГ двумя способами.

Анализ крови: Ваш врач, фельдшер или другой медицинский работник воспользуется иглой для взятия небольшого количества крови из вены на вашей руке. Это может показаться немного неудобным, но это очень быстрый процесс.У вас могут быть небольшие синяки в этой области, но они пройдут через несколько дней.

Анализ мочи: Ваш врач может попросить вас сдать образец мочи или несколько образцов в течение 24 часов. 24-часовой процесс дает более точное представление о вашем уровне ФСГ, который может меняться в течение дня.

Результаты

Ваш врач должен получить результаты через день или два после проведения теста.

Результатом будет число, которое измеряет ФСГ в так называемых «милли-международных единицах на миллилитр» (млU / мл).Диапазон здоровых значений зависит от вашего пола и возраста (а также для женщин, где вы находитесь в период менструального цикла или в период менопаузы).

Высокого или низкого уровня ФСГ недостаточно, чтобы ваш врач мог поставить какой-либо диагноз.

Ваш врач может также проверить ваши уровни других гормонов, в том числе:

Сообщите своему врачу, какие лекарства вы принимаете. Некоторые лекарства, в том числе противозачаточные и гормональные препараты, могут снизить уровень ФСГ. Такие препараты, как циметидин (тагамет), кломифен (кломид, серофен), наперстянка и леводопа, могут повысить уровень ФСГ.

Как гормоны могут влиять на глаза и зрение

Гормоны — это химические вещества в вашем теле, которые контролируют деятельность во всем теле. Гормоны, которые часто называют «посланниками» организма, проходят через кровоток и другие жидкости к органам и тканям, сообщая клеткам тела, что и когда делать. Голод, поведение, сон, размножение и настроение — это лишь некоторые из основных функций организма, которые координируются и контролируются гормонами. Каждый человек испытывает гормональные изменения на протяжении всей своей жизни, и эти изменения затрагивают все части вашего тела, включая глаза.

Гормоны и зрение детей

Детское тело быстро растет и меняется в период полового созревания, когда гормоны повышаются. По мере того, как их руки и ноги становятся длиннее, растут и их глазные яблоки. Это удлинение глазного яблока может вызвать нечеткое зрение из-за близорукости (близорукости).

«Как только гормоны подростка стабилизируются, зрение также должно стать более стабильным», — объясняет Стивен Липски, доктор медицины, детский офтальмолог из Атланты, штат Джорджия. «Но важно ежегодно проходить обследование зрения во время и после полового созревания, чтобы убедиться, что у вашего ребенка самое лучшее зрение.”

Женщины и гормональные изменения зрения

Благодаря гормонам у женщин могут наблюдаться изменения зрения на протяжении всей своей взрослой жизни. С этим во многом связаны гормоны эстроген и прогестерон. Их изменение уровня может повлиять на сальные железы глаз, что может привести к их сухости. Эстроген также может сделать роговицу менее жесткой и более эластичной, что может повлиять на то, как свет проникает в глаз. Сухость и изменение рефракции могут вызвать нечеткое зрение, а также затруднить ношение контактных линз.

«Благодаря гормональному влиянию противозачаточных таблеток, беременности и менопаузы женщины могут на протяжении всей жизни иметь неустойчивое зрение», — говорит Елена Хименес, доктор медицины, офтальмолог из Пуэрто-Рико. «У нас может быть нечеткое зрение или раздраженные, неприятно сухие глаза. Часто смазывающие глазные капли могут помочь при сухости, связанной с гормональными изменениями ».

К счастью, нечеткое зрение из-за гормональных изменений часто проходит, когда уровень гормонов выравнивается. Однако, если ваше зрение не возвращается к норме через пару месяцев после беременности, или оно внезапно меняется или становится очень размытым, очень важно сразу же обратиться к офтальмологу, чтобы исключить более серьезные заболевания глаз, такие как диабет.

Гормоны щитовидной железы и зрение

Гормоны щитовидной железы играют решающую роль в развитии организма, включая развитие глаз.

Заболевание щитовидной железы глаз развивается, когда щитовидная железа не вырабатывает гормоны нужного количества или типа. Одно заболевание, называемое болезнью Грейвса, развивается, когда антитело (белок крови) атакует щитовидную железу, что часто приводит к чрезмерной или недостаточной выработке гормона щитовидной железы. Это же антитело может атаковать ткани вокруг глаза.Симптомы включают выпученные глаза. Однако, хотя одни и те же антитела атакуют щитовидную железу и глаза, возникающие в результате проблемы с щитовидной железой и проблемы с глазами — это две разные проблемы. Заболевание щитовидной железы глаз может возникнуть даже при нормальной работе щитовидной железы.

Аномальные уровни гормонов щитовидной железы могут влиять на другие аспекты развития глаз и болезней.

Исследования показали, что люди с повышенным уровнем определенного гормона щитовидной железы (Т4) подвергаются повышенному риску возрастной дегенерации желтого пятна (ВМД) и других изменений сетчатки.В другом исследовании уровень гормонов щитовидной железы, по-видимому, влияет на постоянное развитие и регуляцию глазных колбочек (клеток, отвечающих за ваше цветовое зрение).

Когда следует обратиться к врачу по поводу изменений зрения?

Изменение зрения с возрастом — это нормально. Однако вот некоторые изменения, указывающие на возможную проблему с глазами:

• Выпуклость одного или обоих глаз;
• Темная завеса или вуаль, закрывающая обзор;
• Снижение зрения, даже временное;
• Искаженное зрение;
• Двоение в глазах;
• Избыточный полив / разрывание;
• Ореолы (цветные кружки вокруг огней);
• Потеря периферического (бокового) зрения;
• Новые плавающие объекты (черные «нити» или пятнышки в видении) и / или вспышки света;
• Боль в глазу;
• Необычный эффект красных глаз.

Если у вас есть какие-либо из этих симптомов или вы чувствуете, что ваше зрение изменилось внезапно, немедленно обратитесь к офтальмологу. Ваш офтальмолог может попросить вас посетить врача, чтобы узнать, являются ли несбалансированные гормоны фактором изменения вашего зрения.

Признаки и симптомы лицево-плечевой мышечной дистрофии (ФСГ, ЛЛПД) — Заболевания

Признаки и симптомы

Возраст начала, прогрессирование и тяжесть фациально-плечевой мышечной дистрофии (ЛЛД) сильно различаются.

Обычно симптомы развиваются в подростковом возрасте, при этом большинство людей замечают некоторые проблемы к 20 годам, хотя слабость некоторых мышц может начаться уже в младенчестве и уже к 50 годам. У некоторых людей заболевание может быть настолько легким, что симптомы не заметны. В этих случаях болезнь может быть диагностирована только после того, как за медицинской помощью обратится другой, более пораженный член семьи.

Люди с ЛЛПД часто не обращаются к врачу до тех пор, пока не задействуются мышцы плеча или ног, и им трудно дотянуться до головы или подняться и спуститься по лестнице.При тщательном расспросе многие люди могут вспомнить, что у них в детстве были симптомы, такие как торчащие лопатки или проблемы с броском мяча. Очень часто люди говорят, что они никогда не могли свистеть или надуть воздушный шар, или что у них были проблемы с питьем через трубочку, но, возможно, они не связывали эти проблемы с мышечной дистрофией.

FSHD не влияет на ощущения, не влияет на способность контролировать мочевой пузырь и кишечник или на сексуальную функцию.

У большинства людей с ЛЛПД болезнь прогрессирует очень медленно.До того, как болезнь станет серьезной инвалидностью, может пройти до 30 лет, и это случается не со всеми. По оценкам, около 20% людей с ЛЛПЛ в конечном итоге используют инвалидную коляску, по крайней мере, некоторое время. Дополнительные сведения о мерах по коррекции некоторых из этих симптомов см. В разделе «Медицинское обслуживание».

Слабость мышц живота

У многих людей с ЛЛПД развивается слабость в мышцах живота. Они могут ослабнуть на ранней стадии заболевания. По мере прогрессирования абдоминальной слабости у человека развивается лордоз , преувеличенная дуга в поясничной (нижней) области позвоночника.

Патологии сетчатки глаза

Некоторые аномалии кровеносных сосудов сетчатки, «экрана» на задней стороне глаза, на который проецируются визуальные изображения, часто обнаруживаются у 50–75% людей с ЛЛПД. ^1,2 К счастью, очень немногие люди имеют в результате этого проблемы со зрением, но пациенты должны находиться под наблюдением окулиста. Снижение остроты зрения наблюдается примерно у 1% пациентов с ЛЛПД. По неясным причинам проблема обычно чаще встречается при ЛЛПД с младенческим началом.

Из-за слабости лица глаза могут оставаться частично открытыми во время сна у пациентов с ЛЛПД, ³ , что может вызвать экспозиционный кератит (воспаление роговицы). Чтобы предотвратить повреждение глазного яблока, на ночь можно использовать офтальмологические мази и повязки. Однако ленту нельзя накладывать прямо на веко, поскольку пластырь может соскользнуть и повредить роговицу.

Функция сердца и дыхания

Хотя поражение сердца иногда может быть фактором ЛЛПД, оно редко бывает тяжелым и часто обнаруживается только при специализированном тестировании.Некоторые эксперты недавно рекомендовали мониторинг сердечной функции у людей с ЛЛПД.

Мышцы, используемые для дыхания, обычно не поражаются при ЛЛПД, как при других формах мышечной дистрофии. Однако некоторым пациентам может быть рекомендовано тестирование функции легких через определенные промежутки времени. Дыхательная недостаточность возникает редко; однако около 1% пациентов с ЛЛПД могут нуждаться в искусственной вентиляции легких в ночное время. ⁴

Дисфагия (затруднение глотания) редко встречается у пациентов с ЛЛПД, но может развиваться из-за слабости челюсти и язычных мышц. ⁵

Слабость лица

Слабость на лице может затруднить использование соломинки или даже улыбку.

Слабость лица часто является первым признаком ЛЛПД. Люди с ЛЛПД могут не сразу заметить это, и обычно их внимание привлекает кто-то другой.

Больше всего поражаются мышцы вокруг глаз и рта. Трудно улыбнуться, сморщить губы или набрать силу во рту, поэтому у людей с этим заболеванием возникают проблемы с воздушными шарами, соломинкой и свистом.

Слабость бедра

У некоторых людей также возникает слабость мышц бедра, окружающих таз (тазовый пояс , ). Это случается не со всеми. Слабость в бедрах, кажется, чаще всего начинается в среднем зрелом возрасте, если вообще случается.

Слабость бедра вызывает затруднения при вставании со стула или подъеме по лестнице и может привести к необходимости использования инвалидной коляски, особенно при поездках на большие расстояния. Иногда также поражаются мышцы верхней части ноги. Слабость тазового пояса может привести к коварной походке и способствовать лордозу, так часто наблюдаемому при ЛЛПД.

У детей с ЛЛПД слабость тазобедренного сустава может быть первым, на что замечают родители, потому что она вызывает проблемы при ходьбе и беге.

Патологии суставов и позвоночника

Позвоночный столб состоит из множества суставов между позвонками. Позвоночник спроектирован таким образом, чтобы быть гибким, чем-то похожим на игрушку-обтяжку, поэтому, когда мышцы, окружающие позвоночник, ослабевают, столбик смещается.

Смещение часто принимает форму лордоза , при котором позвоночник чрезмерно выгибается, а живот выпячивается.Но он также может принимать форму сколиоза , при котором позвоночник выгибается в сторону, как S. Сколиоз, который иногда возникает при ЛЛПД, обычно не тяжелый.

Слабость в голени

По мере прогрессирования ЛЛПД мышцы передней и боковой части голеней (малоберцовые мышцы) часто ослабевают. Это мышцы, которые позволяют нам поднимать переднюю часть стопы при ходьбе, чтобы мы не споткнулись о пальцы ног.

Когда эти мышцы ослабевают, стопа остается в опущенном положении после отталкивания во время ходьбы, иногда спотыкаясь о ходунке.Это состояние называется опусканием на фут .

Врач может сказать: «Иди на каблуках, как пингвин», чтобы проверить силу этих мышц, поднимающих ступни. На вопрос, люди скажут: «Кажется, я ловлю ногу, когда иду» или «Кажется, я падаю через собственные ноги». Проблемы с лестницей и неровными поверхностями — обычное дело.

Не у всех с ЛЛПД возникает эта проблема голени.

Легкая потеря слуха

Потеря слуха иногда возникает при ЛЛПД, в основном в ее младенческой форме.Часто это незначительно и остается незамеченным до тех пор, пока не будет проведено тщательное тестирование (например, во время рутинной оценки слуха в школе). Некоторые эксперты даже задаются вопросом, действительно ли потеря слуха встречается у людей с заболеванием ЛЛПД у взрослых чаще, чем у взрослых в целом. Причина потери слуха не выяснена.

Когда ЛЛПД начинается в детстве, потеря слуха в диапазоне высоких частот может быть более серьезной, чем у взрослых ЛЛПД.

Боль и воспаление

Воспаление мышц — атака определенных типов клеток иммунной системы — возникает при некоторых мышечных дистрофиях и может быть обширным у некоторых людей с ЛЛПД.

По этой причине ЛЛПД иногда ошибочно принимают за другой тип мышечного заболевания, полимиозит , негенетическое заболевание, при котором иммунная система атакует мышцы. Важное отличие состоит в том, что полимиозит поддается лечению преднизоном, кортикостероидным препаратом, подавляющим воспаление, но преднизон не влияет на течение ЛЛПД. ⁶ Многие побочные эффекты кортикостероидов делают их непрактичным использование только для облегчения дискомфорта.

Боль при ЛЛПД, вероятно, является многофакторной, включая влияние миалгии и биомеханического стресса, связанного с мышечной слабостью и проблемами осанки.Наиболее частые места возникновения боли — это плечо, шея, поясница и голени. От хронической боли страдают от 55% до 80% пациентов с ЛЛПД, а от сильной боли — до 23%. ^6,7,8,9

Слабость в плече

Из-за слабости в плечах и спине, мышцы, которые обычно не видны спереди, видны при ЛЛПД.

Большинство людей с ЛЛПД замечают слабость в области лопаток — лопатки — как первый признак того, что что-то не так.

Лопатки обычно достаточно зафиксированы в своем положении. Они действуют как точки опоры, позволяющие мышцам рук использовать рычаги для подъема предметов, включая их собственный вес.

При ЛЛПД мышцы, удерживающие лопатки на месте, ослабевают, позволяя этим костям чрезмерно двигаться. Лопатки выступают и поднимаются к шее при движении, что называется лопаточным крылом , потому что выступающая кость напоминает крыло.

Кредитное плечо по крайней мере частично потеряно.Слабость часто бывает неодинакова с обеих сторон тела.

Этот мужчина также демонстрирует типичную несимметричную слабость с крыльями лопатки и легким сколиозом.

Вначале человек с ЛЛПД замечает такие вещи, как неспособность эффективно бросать мяч. Позже может быть трудно поднять руки над головой, чтобы сделать прическу, добраться до высокой полки или что-то повесить. Эти проблемы возникают из-за ослабления мышц плеча и плеча. Для получения информации об операции на плече при этой проблеме см. Раздел «Медицинское обслуживание».

Неравная (несимметричная) слабость

У большинства людей с ЛЛПС слабость левой и правой сторон тела хоть немного различается. У некоторых людей с ЛЛПД разница между сторонами может быть весьма разительной. Причина отсутствия симметрии, которая не наблюдается при большинстве типов мышечной дистрофии, не ясна.

Список литературы

1. Padberg, G. W. et al. О значении сосудистых заболеваний сетчатки и потери слуха при фасциально-плечевой мышечной дистрофии. Мышечный нерв (1995). DOI: 10.1002 / mus.880181314
2. Фитцсимонс, Р. Б., Гурвин, Э. Б. и Берд, А. С. Сосудистые аномалии сетчатки при фациоскапуло-плечевой мышечной дистрофии: общая связь с генетическими и терапевтическими последствиями. Мозг (1987). DOI: 10.1093 / мозг / 110.3.631
3. Tawil, R. Facioscapulohumeral мышечная дистрофия. в Справочник по клинической неврологии (2018). DOI: 10.1016 / B978-0-444-64076-5.00035-1
4. Вольгемут, М., Ван Дер Кой, Э. Л., Ван Кестерен, Р. Г., Ван Дер Маарел, С. М. и Падберг, Г. В. Вентиляционная поддержка при фациально-лопаточно-плечевой мышечной дистрофии. Неврология (2004). DOI: 10.1212 / 01.WNL.0000133126.86377.E8
5. Wohlgemuth, M. et al. Дисфагия при фасциально-плечевой мышечной дистрофии. Неврология (2006). DOI: 10.1212 / 01.wnl.0000219760.76441.f8
6. Van Der Kooi, E. L. et al. Влияние тренировок и альбутерола на боль и утомляемость при фасциально-плечевой мышечной дистрофии. J. Neurol. (2007). DOI: 10.1007 / s00415-006-0432-4
7. Jensen, M. P. et al. Хроническая боль у людей с миотонической дистрофией и фациоскапуло-плечевой дистрофией. Arch. Phys. Med. Rehabil. (2008). DOI: 10.1016 / j.apmr.2007.08.153
8. Padua, L. et al. Качество жизни и боль у пациентов с фасциально-плечевой мышечной дистрофией. Мышцы и нервы (2009). DOI: 10.1002 / mus.21308
9. Morís, G. et al. Хроническая боль оказывает сильное влияние на качество жизни при фасциально-плечевой мышечной дистрофии. Мышцы и нервы (2018). DOI: 10.1002 / mus.25991

Узнайте о фолликулостимулирующем гормоне (ФСГ)

Фолликулостимулирующий гормон или ФСГ — это гормон, выделяемый гипофизом в головном мозге, который стимулирует рост яичного фолликула каждый месяц в рамках менструального цикла. Женщины с СПКЯ часто не овулируют ежемесячно из-за низкого уровня ФСГ.

Если ваш врач подозревает, что у вас может быть СПКЯ, он или она назначит анализ крови на ФСГ вместе с другими уровнями гормонов до постановки диагноза.У пожилых женщин, как правило, повышен уровень ФСГ в крови, что указывает на созревание яичников. Это связано с тем, что яичнику требуется большее количество гормона, чтобы задействовать и стимулировать яичный фолликул.

Уровни ФСГ во время вашего цикла

На протяжении менструального цикла уровни ФСГ меняются. Врачи часто проверяют уровень ФСГ на 3-й день цикла. Они считаются вашими базовыми уровнями. ФСГ является частью сложного гормона, включающего лютеинизирующий гормон (ЛГ), эстрадиол и гонадотропин-рилизинг-гормон (ГнРГ).ФСГ стимулирует рост незрелого фолликула. После выращивания он высвобождает эстрадиол, который сигнализирует о высвобождении GnRH и LH, вызывая овуляцию.

Перед овуляцией уровень ФСГ достигает пика, сигнализируя о том, что яичник выпустит яйцеклетку. Как только овуляция произойдет, уровни вернутся к базовому уровню или немного упадут ниже него.

Нормальный исходный уровень ФСГ у менструирующих женщин составляет от 4,7 до 21,5 мМЕ / мл.

Некоторые лекарства, такие как противозачаточные таблетки, кломифен, наперстянка и леводопа, могут изменить результаты теста.Ваш врач проинструктирует вас прекратить прием этих препаратов до проведения теста на ФСГ. В случае гормональной контрацепции ее следует прекратить как минимум за четыре недели до сдачи теста.

ФСГ и планирование беременности

Поскольку женщины с СПКЯ имеют низкий уровень ФСГ и, следовательно, не имеют регулярной овуляции, она, как правило, обращается к специалисту по репродуктивной системе или репродуктивному эндокринологу за помощью в беременности, когда наступит подходящее время.

Эти специалисты, известные как репродуктивные эндокринологи, будут использовать различные препараты и гормоны для стимулирования овуляции и стимуляции секреции половых гормонов у женщин с проблемами фертильности.ФСГ — один из гормонов, к которому они регулярно обращаются.

Репродуктивные эндокринологи будут использовать синтетическую форму ФСГ (такую ​​как Gonal-f, Follistim или Bravelle) для стимуляции образования яйцевых фолликулов в яичниках для внутриматочной инсеминации (IUI) или экстракорпорального оплодотворения (IVF).

Многие женщины часто хотят услышать, что уколы необходимы для стимуляции овуляции. Хотя инъекции могут быть неудобными, важно не упускать из виду более широкую картину — рождение ребенка.

ФСГ и яичниковый резерв

У женщин, которые хотят забеременеть в более позднем возрасте, уровень ФСГ используется для проверки овариального резерва (количества и качества яйцеклеток, оставшихся у женщины). Ваш врач возьмет анализ крови на третий день менструального цикла. Результаты обычно доступны в течение 24 часов в зависимости от лаборатории.

По результатам лабораторных исследований специалист по фертильности сможет оценить вашу вероятность забеременеть, даже если вы приближаетесь к менопаузе.

Исходные уровни ФСГ будут увеличиваться по мере того, как женщины входят в перименопаузу, что указывает на уменьшение количества ооцитов (яиц). Перименопауза длится в среднем четыре года и заканчивается, когда у женщины не было менструации в течение 12 месяцев.

В этот момент начинается менопауза. Уровни ФСГ в период менопаузы постоянно повышаются до 30 мМЕ / мл и выше.

гонадотропинов при кератоконусе: неожиданные подозреваемые

клеток. 2019 Dec; 8 (12): 1494.

, ^{1, 2, * †} , ^{2, †} , ² , ² , ² , ³ и ³

¹ Департамент клеточной биологии, Центр медицинских наук Университета Оклахомы, Оклахома-Сити, 73104 OK, США

^† Оба автора внесли равный вклад в эту работу.

Поступила 01.10.2019; Принято 21 ноября 2019 г.

Лицензиат MDPI, Базель, Швейцария. Эта статья представляет собой статью в открытом доступе, распространяемую в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Abstract

Кератоконус (КК) — наиболее распространенное эктатическое заболевание роговицы, которое приводит к значительному ухудшению остроты зрения. Фактическое бремя нематериально, учитывая, что KC может нарушить повседневную деятельность (чтение, вождение и различные карьерные пути).Несмотря на десятилетия исследований и клинических исследований, этиология, начало и патобиология KC остаются загадкой. Целью этого исследования было изучить роль гонадотропинов в KC. Мы набрали 86 пациентов с KC (63 мужчины, 23 женщины) и 45 здоровых людей из контрольной группы (22 мужчины, 23 женщины). Образцы плазмы собирали и анализировали с использованием иммуноферментного анализа. Стромальные клетки роговицы от KC и здоровых контролей, а также эпителиальные клетки роговицы человека были исследованы на маркеры, связанные с гонадотропином.Наши результаты показывают значительные изменения ЛГ / ФСГ у KC по сравнению со здоровым контролем. Наши данные также впервые показывают существование гонадотропинов и их рецепторов в KC. Наше исследование является первым, которое демонстрирует роль ЛГ / ФСГ в KC и расширяет список органов, которые, как известно, экспрессируют гонадотропины или их рецепторы, включая роговицу человека. Наши результаты предполагают, что человеческая роговица способна реагировать на гонадотропины, и предлагают интригующий механизм возникновения и / или прогрессирования KC.

Ключевые слова: кератоконус, гонадотропины, гормональный дисбаланс, дистрофия роговицы

1. Введение

Кератоконус (KC) — сложное, многофакторное заболевание роговицы, которое остается загадкой в ​​контексте его возникновения и скорости прогрессирования. и лежащая в основе патобиология [1,2]. Прогрессирующая эктазия, истончение роговицы и рубцевание — отличительные признаки KC, которые, как известно, поражают как мужчин, так и женщин [1]. Распространенность неуклонно растет, с 1: 2000 в 1980-х годах до 1: 350 в 2000-х годах во всем мире [3,4,5,6], возможно, благодаря технологическим достижениям и лучшей диагностике.

В поисках этиологии появления и прогрессирования KC исследования сообщают о множестве факторов, включая генетику [7], условия окружающей среды [1,8], трение глаз [9] и гормональный дисбаланс [10]. В последнее время наша группа сосредоточилась на гормональном дисбалансе и их роли в KC. Мы сообщили о значительных изменениях андрогенов и эстрогенов у пациентов с KC по сравнению со здоровыми субъектами. Мы обнаружили значительную активацию дегидроэпиандростерона сульфата (DHEA-S), в то время как эстрон и эстриол подавлялись в образцах плазмы и слюны у пациентов с KC [11].Удивительно, но эти изменения были очевидны независимо от возраста, пола или степени тяжести KC. В той же группе KC мы обнаружили, что гормонально регулируемый белок, индуцированный пролактином белок (PIP), был значительно подавлен во всех KC, что привело нас к мнению, что PIP является сильным биомаркером KC и измеримым индикатором KC [12]. . Однако механизмы передачи сигналов о том, как гормональный дисбаланс и ППГ могут рассказать историю KC, неизвестны. Итак, как гормональный дисбаланс может объяснить большую географическую изменчивость, несоответствие гендерного доминирования или непредсказуемую скорость прогрессирования? Настоящее исследование было направлено на изучение и определение механизмов, лежащих в основе гормонального дисбаланса при KC.

Идея о том, что половые гормоны играют роль в KC, не нова. Рецепторы эстрогенов и андрогенов присутствуют в роговице человека, хотя их роль неясна [13]. Роль половых гормонов в возникновении изменений в роговице во время беременности давно задокументирована, поскольку гормональные колебания приводят к изменениям роговицы, включая увеличение объема роговицы, ее толщины в центральной части и кривизны [14]. Из-за этих гормональных изменений, прогрессирование KC было зарегистрировано у беременных женщин во время беременности и в последующий период, вплоть до шести месяцев после родов [15].Следовательно, понимание механизмов гормональной регуляции KC имеет фундаментальное значение для определения дисфункции и может напрямую влиять на жизнь людей.

Гипофиз отвечает за секрецию различных эндокринных сигнальных гормонов [16], а передний гипофиз вырабатывает фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) и лютеинизирующий гормон (ЛГ), которые в конечном итоге контролируют половые гормоны (андрогены и эстрогены) [17] . ФСГ — гонадотропин, гликопротеиновый полипептидный гормон, который синтезируется и секретируется гонадотропными клетками передней доли гипофиза [16].Известно, что ФСГ регулирует развитие, рост, половое созревание и репродуктивные процессы человеческого тела [18]. ЛГ также продуцируется гонадотропными клетками передней доли гипофиза [17]. У женщин ЛГ вызывает овуляцию и развитие желтого тела, тогда как у мужчин ЛГ стимулирует выработку тестостерона клетками Лейдига [19]. И ФСГ, и ЛГ являются жизненно важными эндокринными гормонами, и их участие в KC никогда не исследовалось. Основываясь на наших недавних открытиях и роли половых гормонов в KC, мы стремились исследовать уровни и модуляцию LH / FSH у пациентов с KC, как системно, так и в микросреде роговицы (т.э., клеточный уровень).

Наши данные показывают значительную модуляцию уровней ЛГ и ФСГ в KC по сравнению с их здоровыми аналогами in vivo, что указывает на системный компонент, который до сих пор оставался неизученным. Кроме того, мы неожиданно обнаружили экспрессию ЛГ, а также рецепторов ЛГ / ФСГ стромальными клетками роговицы человека и рецептора ФСГ эпителиальными клетками роговицы человека in vitro. Эти новые открытия должны впервые квалифицировать роговицу человека как внегонадную ткань и поместить ее в ту же категорию, что и ранее идентифицированные ткани: кожа [20], грудь [21], матка [22] и надпочечники [23]. .

Основываясь на наших выводах, а также на наших предыдущих исследованиях, мы хотели бы предложить новую концепцию начала КС. Мы предполагаем, что KC является системным заболеванием, вызванным гормональным дисбалансом, регулируемым передней долей гипофиза в очень раннем возрасте (если не при рождении), и проявляется в период полового созревания из-за длительного воздействия этих дисбалансов на роговицу. Необходимы дальнейшие исследования и уточнение сигнальных событий, опосредованных LH / FSH, вместе с учетом перекрестных помех между путями.Такие исследования позволят нам понять корни KC и начать разработку превентивных стратегий.

2. Материалы и методы

2.1. Участники, этическое одобрение, согласие и критерии включения / исключения

Это исследование соответствовало принципам Хельсинкской декларации. Исследования были одобрены комитетами региона Центральной Дании по этике научных исследований в области здравоохранения (номер протокола: 1-10-72-127-16) и Комитетом по институциональному обзору (IRB) / этическим комитетом Центра медицинских наук Университета Оклахомы. Dean McGee Eye Institute (протокол IRB № 3450).Все участники прошли тщательное офтальмологическое обследование, включая исследование Pentacam HR, рефракцию и исследование с помощью щелевой лампы, чтобы подтвердить диагноз KC и исключить любые другие офтальмологические заболевания или дистрофии. Здоровые люди из контрольной группы прошли аналогичное офтальмологическое обследование, чтобы убедиться, что у них нет KC или других глазных заболеваний или дистрофий. Были исключены пациенты с каким-либо раком в настоящее время или в анамнезе, а также с серьезными системными заболеваниями. Однако были включены пациенты с хорошо леченной гипертонией, хорошо леченной гиперхолестеринемией и хорошо леченной астмой.Насколько нам известно, пациенты женского пола, включенные в исследование, не находились под контролем противозачаточных средств. Все участники подписали письменное информированное согласие перед участием. Все лабораторные анализы биологических жидкостей человека проводились вслепую, чтобы свести к минимуму систематическую ошибку. показаны группы степени тяжести KC, которые были определены в соответствии с максимальной кривизной роговицы (Kmax; наихудший / наиболее тяжелый глаз), а также демографические характеристики пациентов с KC и здоровых людей из контрольной группы.

Таблица 1

Демографические характеристики кератоконуса и здоровой контрольной группы.

Подгруппы	Здоровый контроль	Кератоконус
Пол
Мужской	22	63
Женский	25	23
Возрастные группы
1: 15-29лет	11	20
2: 30-45y / o	21	38
3:> 46y / o	15	15
Уровень серьезности
1: <48D	—	4
2: ≥48-53D	—	20
3: ≥53-58D	—
4: ≥58D	—	43
Лечение
KC (один глаз)	—	13
KC (оба глаза)	—	53
KC (все)	—	86	CXL (один глаз)	—	11
CXL (оба глаза)	—	7
CXL (все)	—	18	45	18
—	9

2.2. Сбор образцов плазмы.

Пробирки объемом 10 мл, покрытые ЭДТА (

) (BD vacutainer ^® , Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США), были использованы для образцов крови от всех участников. Пробирки, покрытые ЭДТА, осторожно переворачивали для закрепления смеси цельной крови и центрифугировали в течение 10 мин при 1300 × g при 4 ° C для отделения плазмы [24]. Затем образцы плазмы хранили при -80 ° C после переноса в стерильные микроцентрифужные пробирки до дальнейших анализов.

2.3. Плазменный ELISA

Уровни гормонов в образцах плазмы определяли с помощью следующих коммерческих наборов для иммуноанализа: ELISA Kit на лютеинизирующий гормон человека (Abcam, Кембридж, Массачусетс, США) и ELISA Kit на человеческий фолликулостимулирующий гормон (Abcam, Кембридж, Массачусетс, США).Вкратце, 50 мкл приготовленных стандартов и образцов загружали в двух экземплярах в соответствующие лунки с последующим добавлением 100 мкл реагента ферментного конъюгата в каждую лунку. Планшеты для ELISA инкубировали в темноте на шейкере при комнатной температуре при 200 об / мин в течение 45 мин. После промывания деионизированной водой в каждую лунку добавляли 100 мкл реагента TMB и осторожно перемешивали в течение 10 с. Затем планшет инкубировали в темноте на шейкере при комнатной температуре при 200 об / мин в течение 20 мин. Затем в каждую лунку добавляли 100 мкл стоп-раствора и осторожно перемешивали в течение 30 с.В течение 15 минут после перемешивания образцы измеряли в планшет-ридере при 450 нм. Статистическое программное обеспечение для построения кривой использовалось для построения 4-параметрической логистической кривой, соответствующей стандартам, а затем для расчета результатов для всех образцов.

2.4. Обработка ткани роговицы и выделение клеток

Здоровые роговицы были получены из Национального обмена исследованиями заболеваний (NDRI). KC роговицы были получены от людей сразу после трансплантации роговицы. Критерии включения / исключения для здоровых контролей требовали отсутствия офтальмологических заболеваний, диабета или инфекционных состояний.Ткани пациентов с KC, которые ранее подвергались перекрестному сшиванию коллагена, были исключены.

Стромальные клетки: Стромальные клетки роговицы выделяли из здоровой (HCF) и KC (HKC) роговицы. И HCF, и HKC были выделены, как описано ранее [25,26]. Вкратце, с помощью хирургического скальпеля удалили эпителий и эндотелий роговицы. Затем строму роговицы промывали стерильным PBS, разрезали на мелкие кусочки (приблизительно 2 × 2 мм) и помещали в колбы; затем клеткам давали прилипнуть.Эксплантаты выращивали в течение 2–4 недель при 37 ° C / 5% CO ₂ / относительной влажности 95% с использованием минимальной необходимой среды Eagle (EMEM) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (Atlanta Biologicals, Flowery Branch, GA, USA. ) и антибиотик / антимикотик (Anti / Anti, Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США). После слияния клетки выделяли после трипсинизации, субкультивировали или замораживали, используя стандартные протоколы криозащиты.

Эпителиальные клетки: Иммортализованные теломеразой эпителиальные клетки роговицы человека (HCEC) были любезно предоставлены доктором.Pablo Argueso (Schepens Eye Research Institute / Mass. Eye and Ear, Бостон, Массачусетс, США) и хранили в жидком азоте до дальнейшего анализа [27].

2,5. Клеточные культуры и модели in vitro

Трехмерные конструкции — стромальные клетки: HCF и HKC высевали с плотностью 1 × 10 ⁶ клеток / лунку на поликарбонатных мембранных вставках с шестью лунками с порами 0,4 мкм (VWR, Рэднор, Пенсильвания, США). Клетки культивировали в EMEM, содержащем 10% FBS, 1% антибиотика, и стимулировали стабильным производным витамина C (0.5 мМ 2-O -α-d-глюкопиранозил-1-аскорбиновая кислота: Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США). Культуры выращивали в общей сложности в течение 4 недель, а свежую среду подавали через день на время исследования. Экстракция белка и дальнейший анализ проводились через 4 недели.

Двумерные традиционные культуры — эпителиальные клетки: клетки выращивали из жидкого азота и культивировали в колбе Т75 в эпителиальной среде, состоящей из среды для роста кератиноцитов 2 PromoCell (VWR, Radnor, PA, США), раствора пенициллин-стрептомицина ( ThermoFisher, Рокфорд, Иллинойс, США) и CaCl ₂ (Sigma-Aldrich, St.Луис, Миссури, США). После слияния клетки удаляли трипсинизацией и высевали в 6-луночный планшет из расчета 1 × 10 ⁶ клеток / лунку в эпителиальную среду. Клетки культивировали при 37 ° C в течение 24 часов перед экстракцией белка [27,28].

2.6. Экстракция белка и вестерн-блот-анализ

Все культуры собирали и дважды промывали PBS, и общий белок выделяли с использованием буфера для однократного анализа радиоиммунопреципитации (RIPA) (50 мМ Tris pH 8, 150 мМ NaCl, 1% Triton X-100 и 0.1% SDS), содержащий коктейль ингибиторов протеаз (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США). Лизаты клеток центрифугировали при 4 ° C, супернатант выделяли и подвергали анализу Pierce BCA Protein (ThermoScientific, Rockford, IL, USA) для количественного определения концентрации белка. 12-луночные гели Novex с 4–20% трис-глицином mini WedgeWell (FisherScientific, Hampton, NH, USA) подвергали электрофорезу при 130 В в течение 1,5 ч и переносили на нитроцеллюлозную мембрану при 100 В в течение 1 ч на льду. Блоты блокировали в 5% сухом молоке (Great Value, Bentonville, AR, USA) в течение 1 ч при комнатной температуре при встряхивании.После приготовления первичных антител в разведении 1: 1000 блоты инкубировали с мышиным моноклональным антителом ФСГ (FisherSc Scientific, Хэмптон, штат Нью-Йорк, США) и следующими первичными поликлональными антителами кролика: β-актином (Abcam, Кембридж, Массачусетс, США), ФСГ. -R (Абкам, Кембридж, Массачусетс, США), LH-R (Абкам, Кембридж, Массачусетс, США) и LH (Биосс, Вобурн, Массачусетс, США). Образцы встряхивали в течение ночи при 4 ° C и промывали TBST перед инкубированием в разведенных вторичных антителах козьих антимышиных IgG (H + L) AlexaFluor Plus 555 (ThermoFisher Scientific, Рокфорд, Иллинойс, США) при качании в течение 1 часа. при комнатной температуре.После промывки TBST блоту давали возможность высохнуть и визуализировали с помощью тепловизора ChemiDoc-It ² . Результаты анализировали путем нормализации значений экспрессии домашнего антитела β-актина (Abcam, Кембридж, Массачусетс, США).

2.7. Статистический анализ

Анализ и представление данных выполняли с использованием GraphPad Prism 7.0 (GraphPad Software, Inc., Ла-Хойя, Калифорния, США). Данные представлены в виде среднего значения +/- SEM с использованием гистограмм. Точечные диаграммы и репрезентативные вестерн-блоты представлены в качестве дополнительных рисунков.При использовании однофакторного дисперсионного анализа и t-критерия, если необходимо, значение p <0,05 считалось значимым. Число n для каждого эксперимента указано в соответствующей легенде и / или столбчатой ​​диаграмме.

3. Результаты

3.1. ЛГ / ФСГ в здоровых контролях и KC

Экспрессию ЛГ и ФСГ в образцах плазмы человека от пациентов с KC и здоровых контролей определяли с помощью ELISA. Человеческая плазма легко доступна и широко используется как в клинических, так и в биологических исследованиях [12,29].Уровни ФСГ были повышены у KCs, но незначительно по сравнению со здоровым контролем (A). Точно так же уровни ЛГ не показали значительных различий между здоровыми и KC (A). У здоровых людей уровень ЛГ был выше, чем у ФСГ (А), в то время как у КК наблюдалось обратное (А).

Экспрессия ЛГ и ФСГ и соотношение ЛГ / ФСГ в здоровых (n = 47) и KC (n = 86) образцах крови (плазмы). ( A ) Общие уровни как для ЛГ, так и для ФСГ, и ( B ) соотношение ЛГ / ФСГ у здоровых контролей и KC.* p <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001. (См. Дополнительные материалы - рисунок S1).

Циркулирующие уровни соотношения ЛГ / ФСГ считаются более важным показателем и были исследованы как потенциальный маркер синдрома поликистозных яичников [30]. Наши результаты показали значительно более низкое соотношение ЛГ / ФСГ у KCs по сравнению со здоровым контролем (B). Это первое из когда-либо опубликованных свидетельств, предполагающих корреляцию между патологией KC и циркулирующим LH / FSH.

3.2. Гендерная зависимость

В зависимости от географического региона и группы пациентов гендерная предвзятость в KC в лучшем случае непостоянна. Мы исследовали уровни ЛГ и ФСГ у пациентов мужского и женского пола. Наши данные показывают, что уровни как ЛГ (А), так и ФСГ (В) были выше у женщин по сравнению с мужчинами. Это было верно как для здоровых контролей, так и для KC, хотя это несоответствие было гораздо более заметным для KC. Кроме того, уровень ФСГ у KC женщин был значительно выше, чем уровень ФСГ у здоровых женщин (B).

Гендерно-зависимая экспрессия ЛГ, ФСГ и отношения ЛГ / ФСГ в здоровых образцах крови (плазмы) и KC. ( A ) Здоровые мужчины (n = 22), здоровые женщины (n = 25), KC мужчины (n = 63) и KC женщины (n = 23) уровни ЛГ; ( B ) здоровый мужчина (n = 22), здоровая женщина (n = 25), KC мужчина (n = 63) и KC женщина (n = 23) уровни ФСГ; и ( C ) соотношение ЛГ / ФСГ у самцов и самок у здоровых контролей и KC. * p <0,05, ** p <0,01, **** p <0.0001. (См. Дополнительные материалы - рисунок S2).

Что касается соотношения ЛГ / ФСГ, KC показали более низкое соотношение как у мужчин, так и у женщин (C), по сравнению со здоровыми аналогами. В частности, соотношение ЛГ / ФСГ у самок с KC, как правило, было ниже, чем у здоровых женщин, но незначительно (C). Однако соотношение ЛГ / ФСГ у мужчин с KC было значительно ниже по сравнению со здоровыми мужчинами (C).

ЛГ и ФСГ связываются с рецепторами в яичках и яичниках, регулируя функцию гонад, способствуя выработке половых стероидов и гаметогенезу.Существует известная гендерная предвзятость для двух гормонов, которая проявляется ниже по течению от половых гормонов. Это предполагает, что любые наблюдаемые здесь изменения больше связаны с гендерной патологией KC, а не с гендерной предвзятостью LH и FSH. Следовательно, соотношение ЛГ / ФСГ может быть мерой, используемой для «обхода» всех несоответствий и несоответствий, наблюдаемых между полами, в KC, в ​​разных географических регионах.

3.3. Возрастная зависимость

KC, как известно, появляется в период полового созревания и останавливается в возрасте 40-50 лет.Поэтому мы исследовали уровни в плазме как ЛГ, так и ФСГ в трех возрастных группах: 15–29 лет, 30–45 лет и 46 лет. И ЛГ, и ФСГ оставались неизменными у KC и здоровых людей в контрольной группе для возрастных групп 15–29 лет и 30–45 лет (A). Однако в возрастной группе 46 лет и старше значительная повышающая регуляция ЛГ (А) или ФСГ (В) наблюдалась у здоровых людей из контрольной группы и у KC соответственно. Отношение ЛГ / ФСГ показало значительную прогрессирующую регуляцию понижения активности у KC от более молодого к старшему поколению, тогда как соотношение оставалось неизменным у здоровых контролей (C).

Зависимая от возраста экспрессия ЛГ и ФСГ и соотношение ЛГ / ФСГ в здоровых образцах крови (плазмы) и KC. Были исследованы три возрастные группы: здоровые 15–29 лет (n = 11), KC 15–29 лет (n = 20), здоровые 30–45 лет (n = 21), KC 30–45 лет. / o (n = 38), здоровые ≥ 46 лет (n = 15) и KC ≥ 46 лет (n = 28). ( A ) уровни ЛГ у здоровых контролей и KC, по возрастным группам, ( B ) уровни FSH в здоровых контролях и KC, по возрастной группе, и ( C ) соотношение LH / FSH в здоровых контролях и KCs , на возрастную группу.* p <0,05, ** p <0,01. (См. Дополнительные материалы - рисунок S3).

Мы дополнительно исследовали влияние возраста на пол, у KC и здоровых людей из контрольной группы. Уровень ЛГ и ФСГ у мужчин и женщин не изменился для возрастных групп 15–29 лет и 30–45 лет (A, B, соответственно), как у KCs, так и у здоровых контролей. Однако в возрастной группе от 46 лет наблюдался повышенный уровень ЛГ и ФСГ у женщин с KC и здоровых женщин. Это говорит о том, что наблюдаемое нами увеличение общего количества ЛГ и ФСГ () в значительной степени связано с женским населением.

Эффект возраста как функция гендерной экспрессии ЛГ и ФСГ и соотношения ЛГ / ФСГ в образцах крови (плазмы) здоровых людей и KC. Были исследованы следующие группы: здоровые мужчины 15–29 лет (n = 7), здоровые женщины 15–29 лет (n = 4), мужчины KC 15–29 лет (n = 18), женщины KC. 15–29 лет (n = 2), здоровые мужчины 30–45 лет (n = 10), здоровые женщины 30–45 лет (n = 12), мужчины KC 30–45 лет (n = 12) = 26), KC женщины 30–45 лет (n = 12), здоровые мужчины ≥ 46 лет (n = 5), здоровые женщины ≥ 46 лет (n = 9), мужчины KC ≥ 46 лет / o (n = 19), KC Женщины ≥ 46 лет (n = 9).( A ) уровни ЛГ у здоровых контролей и KC, ( B ) уровни ФСГ у здоровых контролей и KCs, и ( C ) соотношение ЛГ / ФСГ у здоровых контролей и KC по возрастной группе. ** p <0,01, **** p <0,0001. (См. Дополнительные материалы - рисунок S4).

Анализ соотношения ЛГ / ФСГ не показал значительных изменений. Однако интересно отметить, что самое низкое соотношение ЛГ / ФСГ наблюдалось у женщин с KC в возрастных группах 15–29 лет и ≥46 лет.

3.4. Степень KC

Мы исследовали уровни ЛГ и ФСГ на основе степени тяжести KC. Группы тяжести определялись по максимальной кривизне роговицы (Kmax). Уровни ЛГ (А) и ФСГ (В) в значительной степени не изменились среди степеней тяжести (от KC1 до KC4), а также по сравнению со здоровым контролем. Отношение LH / FSH было значительно снижено в группе KC4 (C), но оставалось неизменным для остальных групп тяжести. Может существовать корреляция между LH / FSH и степенью тяжести KC, однако для безопасного определения этой связи необходимо будет исследовать более крупные когорты.

Зависимая от степени тяжести экспрессия ЛГ и ФСГ и соотношение ЛГ / ФСГ в здоровых (n = 47) и KC (n = 86) образцах крови (плазмы). Степени тяжести были определены на основе Kmax: KC-1 (n = 4), KC-2 (n = 20), KC-3 (n = 19) и KC-4 (n = 43). ( A ) Уровни ЛГ у здоровых контролей и KC, для всех степеней тяжести, ( B ) Уровни ФСГ у здоровых контролей и KC, для всех степеней тяжести, и ( C ) соотношение ЛГ / ФСГ у здоровых контролей и KC. , любой степени серьезности.* р <0,05. (См. Дополнительные материалы - рисунок S5).

3.5. Лечение KC

Чтобы определить, влияет ли присутствие KC и / или тип лечения (-ов) на уровни ЛГ или ФСГ, мы исследовали следующие группы: Лица с: (1) KC на одном глазу, (2) KC на обоих глазах, (3) KC с трансплантатами роговицы, (4) Все KC независимо от лечения (-ий), (5) KC со сшивкой коллагена на одном глазу, (6) KC со сшивкой коллагена на обоих глазах и (7) Все KC с обработкой сшиванием коллагена, независимо от количества глаз.Все семь групп были нанесены на график и сравнены с контрольной группой здоровых (). Не было значительных различий в уровнях LH (A) или FSH (B) между тестируемыми группами / обработками и их здоровыми аналогами. Точно так же не было значительных различий между группами / обработками или по сравнению со здоровыми в соотношении ЛГ / ФСГ. Отношение ЛГ / ФСГ в KC (все) было значительно подавлено по сравнению со здоровым, как показано в B.

Экспрессия ЛГ и ФСГ, а также соотношение ЛГ / ФСГ у здоровых (n = 47) и KC (n = 86). ) образцы крови (плазмы).Сравнивали семь разных групп: (1) KC на одном глазу (n = 13), (2) KC на обоих глазах (n = 53), (3) KC с трансплантатами роговицы (n = 9), (4) все KCs. независимо от лечения (n = 86), (5) KC со сшивкой коллагена на одном глазу (n = 11) и (6) KC со сшивкой коллагена на обоих глазах (n = 7), и 7) все KC с обработкой сшиванием коллагена, независимо от количества глаз (n = 18). ( A ) уровни ЛГ, ( B ) уровни ФСГ и ( C ) соотношение ЛГ / ФСГ.* р <0,05. (См. Дополнительные материалы - рисунок S6).

Корреляция между лечением и тем, изменяются ли уровни ЛГ / ФСГ с течением времени после лечения КС, потребует продольного когортного исследования.

3.6. Гонадотропины и внегонадные ткани

Основываясь на наших результатах с образцами плазмы, мы исследовали экспрессию ЛГ, ФСГ и их рецепторов (ЛГР и ФСГР), используя нашу созданную трехмерную модель in vitro. A показывает экспрессию LH как в HCF, так и в HKC без значительных различий.ФСГ не экспрессируется ни в HCF, ни в HKC. Экспрессия LHR была значительно повышена в HKC (B), тогда как FSHR (C) была значительно снижена по сравнению с HCF.

Экспрессия LH, LHR и FSHR в HCF и HKC. ( A ) экспрессия LH in vitro, ( B ) экспрессия LHR in vitro и ( C ) экспрессия FSHR in vitro. * p <0,05, ** p <0,01. (См. Дополнительные материалы - рисунок S7).

Насколько нам известно, это первое исследование, демонстрирующее присутствие LH / LHR / FSHR в строме роговицы человека.Эти данные повышают вероятность того, что гонадотропины могут играть ключевую роль в возникновении и / или прогрессировании KC. По крайней мере, стромальные клетки роговицы имеют подходящие рецепторы для ответа на сигналы, инициированные гонадотропинами. Чтобы дополнительно определить, присутствует ли гонадотропин только в строме роговицы или распространяется на другие клеточные слои внутри роговицы, мы протестировали установленные эпителиальные клетки in vitro. показывает, что HCEC экспрессируют только FSH-R. Мы не обнаружили экспрессии LH, FSH или LH-R.

4. Обсуждение

Человеческий глаз долгое время считался «нейтральным» с точки зрения гендерных предубеждений. Никогда не было достаточно доказательств того, что на физиологию глаза или патологию влияет пол. Однако сегодня мы знаем, что секс играет ключевую роль в здоровье глаз и заболеваниях, обусловленных наличием (или отсутствием) половых гормонов.

Половые гормоны циркулируют в кровотоке и глубоко влияют на физиологию многих органов и тканей [31].Их эффекты сильно зависят от рецепторов, присутствующих в различных тканях / клетках-мишенях. В роговице человека половые гормоны присутствуют в слезной жидкости, секретируемой мигрирующими плазматическими клетками и секреторным эпителием слезной железы [32,33]. Неизбежно, что слезы находятся в прямом контакте с поверхностью глаза, любые гормональные колебания могут изменить гомеостаз роговицы и, следовательно, остроту зрения. Водяная жидкость, расположенная кзади от роговицы, также может влиять на гомеостаз роговицы.

Первое сообщение о связи между половыми гормонами и глазными заболеваниями было установлено Хенриком Шегреном в 1930 году, когда он описал корреляцию между гормональными изменениями у женщин и синдромом сухого глаза (DES) [34]. В более поздних исследованиях было лучше охарактеризовано значение и роль половых гормонов в структурах глаза. В контексте KC всегда подозревали гормональную регуляцию из-за корреляции с половым созреванием [35] и беременностью [15], а также тенденции к стабилизации после менопаузы [36].Однако клинических исследований не было. Kahan et al. сообщили о более высоких уровнях гормона тироксина в слезах у пациентов с KC по сравнению со здоровыми коллегами [37]. Однако уровни тироксина в крови (сыворотке) этих пациентов не претерпели значительных изменений. Thanos и соавторы также обнаружили более высокие уровни тироксина слезы в KCs, а также высокую экспрессию рецепторов тироксина в стромальных клетках KC по сравнению со здоровым контролем [2]. Хотя существует очень ограниченная литература по тироксину и KC, известно, что он играет роль в метаболизме и физиологической функции роговицы, а также других тканей [2].Кроме того, в недавнем тематическом исследовании, опубликованном Lee et al. [38], 17-летней девушке была выполнена частичная тиреоидэктомия без заместительной гормональной терапии щитовидной железы с нормальным исходным офтальмологическим обследованием. В возрасте 29 лет KC появился на правом глазу, что подчеркивает потенциальную связь KC и регуляции щитовидной железы. Лептин, гормон расхода энергии, также был исследован на месте Aydemir et al. [39]. Исследование показало умеренную интенсивность окрашивания клеток роговицы KC, которая, однако, существенно не отличалась от здоровой контрольной группы.Лептин — еще один недостаточно изученный гормон при KC, хотя он может быть интересной целью исследования, учитывая, что уровни лептина повышаются во время беременности и падают после родов [40]. Возможно, что эти изменения в уровнях лептина могут частично объяснить связь между беременными женщинами и прогрессированием KC; однако в настоящее время имеется ограниченное количество доказательств [39]. Наша группа недавно сообщила о значительном повышении DHEA-S и снижении уровней эстрона и эстриола в слезах, слюне и крови (плазме) [12].Довольно удивительно, что наши данные показали, что модуляция этих половых гормонов не зависела от возраста, пола и степени тяжести KC, что позволяет предположить, что во время болезненного состояния меняется что-то более фундаментальное. В свете накопленных данных о половых гормонах и KC мы стремились очертить и разгадать этиологию KC.

KC — очень своеобразное заболевание, распространенность которого по полу и возрасту, по-видимому, сильно варьируется в зависимости от исследуемой когорты (групп). Поэтому мы подозревали, что андрогены / эстрогены не работают в KC из-за дисфункции выше по течению в гормональном каскаде.Наши данные показывают значительную модуляцию гормонов ЛГ и / или ФСГ в KC по сравнению со здоровым контролем. Насколько нам известно, эти два гормона и / или их соотношение никогда не исследовались и не сообщались в контексте KC. Основываясь на наших выводах, мы предполагаем, что дисфункция ФСГ и / или ЛГ является причиной аномальной модуляции DHEA-S, эстриола и эстрона, которую мы видим ниже по течению [10].

Тогда возникает очевидный вопрос: как эти гормональные изменения, наблюдаемые в KC, влияют на микросреду роговицы и имеют ли клетки роговицы механизмы / рецепторы, чтобы получать и реагировать на эти стимулы.Экспрессия рецепторов гормонов в роговице KC малоизучена. На самом деле существует очень мало доказательств. Инь и др. сообщили о снижении рецептора прогестерона (PR) и более высокой экспрессии рецептора андрогена (AR), где Ayan et al. сообщили о более высокой экспрессии рецепторов эстрогена (ER) и AR в роговице KC. Наша группа сообщила о более высоких уровнях мРНК ER и более низких AR в стромальных клетках роговицы, происходящих из KC, по сравнению со здоровым контролем [41]. Вполне возможно, что эти рецепторы имеют решающее значение для поддержания гомеостаза роговицы KC и регулируются аномальными уровнями гормонов, обнаруживаемыми в слезах KC (DHEA-S, эстрон и эстриол), как сообщалось ранее [12].Как рецепторы половых гормонов регулируются in vivo и как уровни гормонов в слезной жидкости взаимодействуют с этими рецепторами, неясно. Аффинность, однако, может варьироваться между тканями и типами клеток, и, следовательно, механизмы KCs могут быть еще более усложнены.

Основываясь на наших данных in vivo, мы исследовали, экспрессируют ли клетки стромы роговицы LH / FSH и их соответствующие рецепторы (LHR / FSHR). Традиционно считается, что экспрессия этих гонадотропинов ограничивается тканью гонад.Однако недавние исследования показали, что по крайней мере ЛГ экспрессируется в некоторых периферических тканях [20,21,22,23]. ФСГ, по-видимому, в большей степени связан с тканями гонад. Невероятно, но и HCF, и HKC экспрессировали ЛГ, но не ФСГ, без существенных различий между этими двумя типами клеток. Кроме того, мы обнаружили экспрессию как LH-R, так и FSH-R с повышенной регуляцией LHR и пониженной регуляцией FSHR в HKC по сравнению с HCF. Неудивительно, что наши результаты были разными в HCEC. HCEC экспрессировали только FSHR, в то время как не было обнаружено экспрессии LH, FSH или LHR.

Уточнение LH / FSH-опосредованной внутриклеточной передачи сигналов для всех типов клеток роговицы имеет решающее значение вместе с пониманием потенциальных перекрестных помех и компенсаторных механизмов между клетками и путями. На данном этапе неясно, какова роль этих рецепторов в роговице человека. Одна возможность заключается в том, что экспрессия опосредуется ЛГ и / или ФСГ, присутствующими в ткани роговицы, слезной жидкости и / или водянистой влаге, что впоследствии приводит либо к защитному, либо к неблагоприятному эффекту на роговицу KC.Другая возможность состоит в том, что эти рецепторы играют роль в прогрессии KC посредством специфического нижестоящего сигнального каскада, что в конечном итоге приводит к нарушению зрения. Также неизвестно, способна ли роговица человека продуцировать ЛГ или ФСГ, которые затем могут связываться с рецепторами и функционировать как аутокринный или паракринный механизм. Важно отметить, что у женщин необходимо контролировать менструальный цикл в KC, чтобы лучше понять роль ЛГ / ФСГ. Состояние менструального цикла — это то, что в настоящее время игнорируется в клиниках, и поэтому информация отсутствует.Тот факт, что изменения наблюдались в мужской популяции, у которой нет колебаний ЛГ и ФСГ, дает нам уверенность в том, что KC действительно связан с этими гормонами. Одним из ограничений KC является отсутствие тканей на ранних стадиях заболевания. Однако раскрытие клеточных и молекулярных механизмов с использованием клеток / тканей от тяжелого KC более полезно, если мы хотим двигаться в направлении разработки новых методов лечения.

В целом, наши исследования in vitro и in vivo могут предоставить новую парадигму управления и лечения KC.

5. Выводы

Предлагаемый нами способ действия для развития KC заключается в регуляции гонадотропинов в гипофизе и их рецепторах в микроокружении роговицы человека, что приводит к изменениям белков ECM, которые имеют решающее значение для поддержания гомеостаза роговицы. . Вероятно, что дисфункция ЛГ / ФСГ возникает при рождении или на очень ранних этапах жизни, а КС является проявлением длительных гормональных нарушений, происходящих из передней доли гипофиза. Очевидно, что предлагаемый механизм требует дальнейших клинических исследований для подтверждения.Тем не менее, эти механизмы могут объяснить многие характеристики и несоответствия болезни.

Дополнительные материалы

Следующее доступно в Интернете по адресу https://www.mdpi.com/2073-4409/8/12/1494/s1, Рисунок S1: Общая экспрессия ЛГ / ФСГ, Рисунок S2: Гендерно-зависимый ЛГ / Экспрессия ФСГ, Фигура S3: Зависимая от возраста экспрессия ЛГ / ФСГ, Фигура S4: Эффект возраста как функция гендерной экспрессии ЛГ / ФСГ, Фигура S5: Зависимая от тяжести экспрессия ЛГ / ФСГ, Фигура S6: Зависимая от лечения ЛГ / Экспрессия FSH, фигура S7: HCF / HKC-белок экспрессия LH, LHR, FSHR и β-актина, фигура S8: HCEC-белок экспрессия FSHR и β-актина.

Вклад авторов

Концептуализация, D.K .; методология, D.K., B.B., S.M., S.N., S.B.-N. и J.H .; проверка, B.B., S.M. и S.N .; формальный анализ, B.B., S.M., S.N., L.V .; расследование, D.K., B.B., S.M., S.N., L.V., S.B.-N., and J.H .; ресурсы, Д.К. и J.H .; data curation, D.K., S.N. и J.H .; письменная — подготовка оригинального черновика, Д.К. и B.B .; написание — обзор и редактирование, D.K., B.B., S.M., S.N., L.V., S.B.-N., and J.H .; надзор, Д.К. и Дж.

Финансирование

Это исследование финансировалось Национальным институтом глаз (NEI) / Национальными институтами здравоохранения (NIH), номер гранта EY028888, а также Synoptik-Fonden, Fight for Sight Denmark, Орхусским университетом и Эйнаром Виллумсенсом Минделегатом.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирующие организации не играли никакой роли в разработке исследования; при сборе, анализе или интерпретации данных; при написании рукописи или в решении опубликовать результаты.

Список литературы

1. Гордон-Шааг А., Миллодот М., Шнеор Э., Лю Ю. Генетические факторы и факторы окружающей среды кератоконуса. BioMed Res. Int. 2015; 2015: 795738. DOI: 10.1155 / 2015/795738. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2.Танос С., Оллерс П., Мейер Цу Хорсте М., Прокош В., Шлатт С., Зейтц Б., Гациуфас З. Роль тироксина в развитии кератоконуса. Роговица. 2016; 35: 1338–1346. DOI: 10.1097 / ICO.0000000000000988. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Рабиновиц Ю.С. Кератоконус. Surv. Офтальмол. 1998. 42: 297–319. DOI: 10.1016 / S0039-6257 (97) 00119-7. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Кеннеди Р.Х., Борн В.М., Дайер Дж. А. 48-летнее клинико-эпидемиологическое исследование кератоконуса. Являюсь. J. Ophthalmol. 1986; 101: 267–273.DOI: 10.1016 / 0002-9394 (86)

-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Варссано Д., Кайзерман И., Хазарбассанов Р. Топографические паттерны у кандидатов на рефракционную хирургию. Роговица. 2004; 23: 602–607. DOI: 10.1097 / 01.ico.0000121699.74077.f0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Бамашмус М.А., Салех М.Ф., Авадалла М.А. Причины невыполнения кераторефракционной хирургии пациентам, обращающимся за рефракционной операцией в когорте госпитальной группы в «Йемене», Ближний Восток, Африка. J. Ophthalmol. 2010. 17: 349–353. DOI: 10.4103 / 0974-9233.71605. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Задник К., Маннис М.Дж., Джонсон К.А. Анализ контрастной чувствительности у однояйцевых близнецов с кератоконусом. Роговица. 1984; 3: 99–103. DOI: 10.1097 / 00003226-198402000-00004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Крахмер Дж. Х. Растирание глаз может вызвать кератоконус. Роговица. 2004. 23: 539–540. DOI: 10.1097 / 01.ico.0000137168.24883.3e. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Маккей Т. Б., Хьортдал Дж., Сейерсен Х., Карамичос Д. Дифференциальные эффекты гормонов на клеточный метаболизм при кератоконусе in vitro.Sci. Отчет 2017; 7: 42896. DOI: 10,1038 / srep42896. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Маккей Т. Б., Хьортдал Дж., Сейерсен Х., Асара Дж. М., Ву Дж., Карамичос Д. Эндокринные и метаболические пути, связанные с кератоконусом: последствия для роли гормонов в стромальной микросреде. Sci. Отчет 2016; 6: 25534. DOI: 10,1038 / srep25534. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Шариф Р., Бак-Нильсен С., Сейерсен Х., Динг К., Хьортдал Дж., Карамичос Д. Пролактин-индуцированный белок — новый биомаркер кератоконуса.Exp. Eye Res. 2019; 179: 55–63. DOI: 10.1016 / j.exer.2018.10.015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Судзуки Т., Киношита Ю., Тачибана М., Мацусима Ю., Кобаяши Ю., Адачи В., Сотозоно С., Киношита С. Экспрессия рецепторов половых стероидных гормонов в роговице человека. Curr. Eye Res. 2001; 22: 28–33. DOI: 10.1076 / ceyr.22.1.28.6980. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Атас М., Демиркан С., Каратепе Хашас А.С., Гулхан А., Зарарсиз Г. Сравнение эндотелиальных изменений роговицы после факоэмульсификации с помощью поперечных и торсионных аппаратов факоэмульсификации.Int. J. Ophthalmol. 2014; 7: 822–827. DOI: 10.3980 / j.issn.2222-3959.2014.05.15. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Билгихан К., Хондур А., Сул С., Озтюрк С. Прогрессирование кератоконуса, вызванное беременностью. Роговица. 2011; 30: 991–994. DOI: 10.1097 / ICO.0b013e3182068adc. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Джордж Дж. У., Дилле Э. А., Хекерт Л. Л. Современные концепции регуляции гена рецептора фолликулостимулирующего гормона. Биол. Репродукция. 2011; 84: 7–17. DOI: 10.1095 / биолрепрод.110.085043.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Стаматиадес Г.А., Кайзер У.Б. Регуляция гонадотропинов пульсирующим гонадолиберином: передача сигналов и экспрессия генов. Мол. Клетка. Эндокринол. 2018; 463: 131–141. DOI: 10.1016 / j.mce.2017.10.015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Уллоа-Агирре А., Рейтер Э., Крепье П. Передача сигналов рецептора ФСГ: сложность взаимодействий и разнообразие сигналов. Эндокринология. 2018; 159: 3020–3035. DOI: 10.1210 / en.2018-00452. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19.Чой Дж., Смитц Дж. Лютеинизирующий гормон и хорионический гонадотропин человека: различение уникальных физиологических ролей. Гинеколь. Эндокринол. 2014; 30: 174–181. DOI: 10.3109 / 09513590.2013.859670. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Вененси П.Ю., Медури Г., Писсар С., Жоливет А., Лоосфельт Х., Милгром Э., Мисрахи М. Рецепторы лютеинизирующего гормона / хорионического гонадотропина человека в различных структурах эпидермиса. Br. J. Dermatol. 1999; 141: 438–446. DOI: 10.1046 / j.1365-2133.1999.03036.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21.Чен А., Кагановский Э., Рахимипур С., Бен-Ароя Н., Окон Э., Кох Ю. Две формы гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ) экспрессируются в ткани груди человека и сверхэкспрессируются при раке груди: предполагаемый механизм для антипролиферативного действия GnRH путем подавления кислых рибосомных фосфопротеинов P1 и P2. Cancer Res. 2002; 62: 1036–1044. [PubMed] [Google Scholar] 22. Шемеш М. Воздействие гонадотропинов на матку. Репродукция. 2001; 121: 835–842. DOI: 10.1530 / rep.0.1210835. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23.Pabon J.E., Li X., Lei Z.M., Sanfilippo J.S., Yussman M.A., Rao C.V. Новое присутствие рецепторов лютеинизирующего гормона / хорионического гонадотропина в надпочечниках человека. J. Clin. Эндокринол. Метаб. 1996. 81: 2397–2400. DOI: 10.1210 / jcem.81.6.8964884. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Tuck M., Turgeon D.K., Brenner D.E. Глава 5 — Сбор сыворотки и плазмы: преаналитические переменные и стандартные рабочие процедуры в исследовании биомаркеров A2-Issaq, Haleem J. In: Veenstra T.D., редактор. Протеомный и метаболомный подходы к открытию биомаркеров.Академическая пресса; Бостон, Массачусетс, США: 2013. С. 77–85. [CrossRef] [Google Scholar] 25. Карамичос Д., Хатчеон А.Э., Рич К.Б., Тринкаус-Рэндалл В., Асара Дж.М., Зиеске Дж.Д. Модель in vitro предполагает, что оксидативный стресс связан с кератоконусом. Sci. Отчет 2014; 4: 4608. DOI: 10,1038 / srep04608. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Карамичос Д., Зареян Р., Го Х., Хатчеон А.Э., Руберти Дж. В., Зиеске Дж. Д. Новая модель in vitro для кератоконуса. J. Funct. Биоматер. 2012; 3: 760–775.DOI: 10.3390 / jfb3040760. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Gipson I.K., Spurr-Michaud S., Argueso P., Tisdale A., Ng T.F., Russo C.L. Экспрессия гена муцина в иммортализованных линиях роговично-лимбальных и конъюнктивальных эпителиальных клеток человека. Расследование. Офтальмол. Vis. Sci. 2003. 44: 496–506. DOI: 10.1167 / iovs.02-0851. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. МакКейб К.Л., Кунзевицкий Н.Дж., Чизвелл Б.П., Ся Х., Голдберг Дж.Л., Ланза Р. Эффективное создание эндотелиальных клеток роговицы, полученных из стволовых эмбриональных клеток человека, путем направленной дифференцировки.PLoS ONE. 2015; 10: 0145266. DOI: 10.1371 / journal.pone.0145266. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Yu Z., Kastenmuller G., He Y., Belcredi P., Moller G., Prehn C., Mendes J., Wahl S., Roemisch-Margl W., Ceglarek U., et al. Различия между профилями метаболитов в плазме и сыворотке человека. PLoS ONE. 2011; 6: e21230. DOI: 10.1371 / journal.pone.0021230. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Уоллес А.М., Саттар Н. Меняющаяся роль клинической лаборатории в исследовании синдрома поликистозных яичников.Clin. Biochem. Ред. 2007; 28: 79–92. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 31. Burger L.L., Haisenleder D.J., Dalkin A.C., Marshall J.C. Регуляция транскрипции гена субъединицы гонадотропина. J. Mol. Эндокринол. 2004. 33: 559–584. DOI: 10.1677 / jme.1.01600. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Труонг С., Коул Н., Стэплтон Ф., Голебиовски Б. Половые гормоны и сухой глаз. Clin. Exp. Опт. 2014. 97: 324–336. DOI: 10.1111 / cxo.12147. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Версура П., Джаннаккар Г., Campos E.C. Дисбаланс половых стероидов у женщин и синдром сухого глаза. Curr. Eye Res. 2015; 40: 162–175. DOI: 10.3109 / 02713683.2014.966847. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Мурубе Дж. Хенрик Шегрен, 1899–1986. Ocul. Серфинг. 2010; 8: 2–7. DOI: 10.1016 / S1542-0124 (12) 70212-4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Натараджан Р., Равиндран Р. Прогрессирование кератоконуса в результате заместительной гормональной терапии. J. Cataract Refract. Surg. 2019; 45: 1055. DOI: 10.1016 / j.jcrs.2019.04.038. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37.Кахан И.Л., Варсани-Надь М., Тот М., Надрай А. Возможная роль тироксина слезной жидкости в развитии кератоконуса. Exp. Eye Res. 1990; 50: 339–343. DOI: 10.1016 / 0014-4835 (90)

-G. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Ли Р., Эль-Массри А., Эль-Массри Ю., Рандлман Дж. Б. Двусторонний асимметричный кератоконус, вызванный тиреотоксикозом, с долговременной стабильностью после перекрестного сшивания роговицы. J. Refract. Surg. 2018; 34: 354–356. DOI: 10.3928 / 1081597X-20180301-02. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Айдемир О., Назироглу М., Чолакоглу Н., Йилмаз Т., Кукнер А., Кукнер А.С. Лептин в роговице больных кератоконусом и инфекционным кератитом. J. Ocul. Pharmacol. Ther. 2005. 21: 382–387. DOI: 10.1089 / jop.2005.21.382. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Хаджагос-Тот Дж., Дука Э., Самавати Р., Вари С.Г., Гаспар Р. Ожирение во время беременности: новая концепция о роли адипокинов в сократимости матки. Хорват. Med. J. 2017; 58: 96–104. DOI: 10,3325 / cmj.2017.58.96. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41.Шариф Р., Бак-Нильсен С., Хьортдал Дж., Карамичос Д. Патогенез кератоконуса: интригующий терапевтический потенциал пролактин-индуцируемого белка. Прог. Retinal Eye Res. 2018; 67: 150–167. DOI: 10.1016 / j.preteyeres.2018.05.002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Как вы называете безглазую рыбу? — NWF

НАЦИОНАЛЬНАЯ ФЕДЕРАЦИЯ ДИКОЙ ЖИЗНИ РЕЙНДЖЕР РИК ФИНАЛЬНЫЙ ВЫЗОВ МЕХА

ОФИЦИАЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ И ПРАВИЛА КОНКУРСА

Пожалуйста, прочтите внимательно!

КОНКУРС РЕЙНДЖЕРА НАЦИОНАЛЬНОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДИКОЙ ЖИЗНИ RICK FUR CHALLENGE (далее — КОНКУРС) СПОНСИРУЕТСЯ И АДМИНИСТРИРУЕТ НАЦИОНАЛЬНАЯ ФЕДЕРАЦИЯ ДИКОЙ ЖИЗНИ («NWF»). ПРИСОЕДИНЯЙТЕСЬ В БЫСТРО МЕНЯЮЩИЙСЯ МИР С ГЛАВНЫМ МЕСТОМ БИЗНЕСА НА 11100 WILDLIFE CENTER DRIVE, РЕСТОН, ВИРДЖИНИЯ 20190

УЧАСТВУЯ В КОНКУРСЕ, ВЫ СОГЛАШАЕТЕСЬ С ЭТИМИ УСЛОВИЯМИ:

1. УЧАСТНИК: В КОНКУРСЕ могут принять участие все U.S. Законные резиденты не моложе тринадцати (13) лет («Участники»), всем участникам в возрасте до 13 лет потребуется одобрение родителей перед подачей заявки, за исключением жителей, за исключением сотрудников и членов Совета NWF, их ближайших родственников и лиц, проживающих в той же семье, что и такие сотрудники и члены правления. NWF оставляет за собой право проверить, по своему усмотрению, право на участие.

2. ВРЕМЯ УЧАСТИЯ: КОНКУРС открывается в 00:01 по восточному стандартному времени (EST) 15.03.21 и закрывается 4 апреля 2021 года в 23:59 EST.NWF может изменить Период подачи заявок на участие в конкурсе по своему усмотрению.

3. КАК УЧАСТВОВАТЬ: Во время периода подачи заявок на участие в конкурсе все участники должны принять участие в конкурсе, посетив rangerrick.org/finalfur («Веб-сайт»), и следовать инструкциям по регистрации для участия в конкурсе, включая ввод имени участника и контактной информации ( Вход»). В случае возникновения спора относительно любой регистрации, уполномоченный владелец учетной записи с адресом электронной почты, который использовался для регистрации, будет считаться Участником.«Авторизованный владелец учетной записи» — это физическое лицо, которому поставщик доступа в Интернет, поставщик онлайн-услуг или другая организация назначили адрес электронной почты для домена, связанного с предоставленным адресом. От каждого потенциального победителя может потребоваться предъявить доказательство того, что он является уполномоченным владельцем учетной записи. Отправляя заявку, вы принимаете Правила.

4. ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ЗАПИСИ: Действительная запись должна содержать ответы на всю запрашиваемую информацию на веб-сайте.Судьи используют эту информацию, чтобы помочь им выбрать победителей. Непредоставление полной информации может дисквалифицировать вашу заявку судьями.

5. КРИТЕРИИ КОНКУРСА: Мы ищем запись в скобках, для которой Участник должен указать адрес электронной почты.

6. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ: Участники должны предоставить заполненную сетку, используя систему Woobox, размещенную на rangerrick.org. Если участник поделится ссылкой на конкурс с другом, и если его друг войдет, первоначальный участник получит одну (1) дополнительную заявку.

7. СУДЕЙСТВО: Заявки будут оцениваться на основе общего количества очков по сравнению с «выигрышной сеткой». Участники будут получать очки на основе заявок, соответствующих победной сетке по раунду. Брекеты, набравшие наибольшее количество очков, будут награждены одним (1) из пяти (5) главных призов. В случае ничьей между участниками в сетке, каждому победителю будет присвоен номер, и победитель будет выбран с помощью генератора случайных чисел. Все решения судей будут окончательными и обязательными.

8. УВЕДОМЛЕНИЕ О ПОБЕДИТЕЛЕ: Победители призов будут уведомлены по электронной почте, почте США, телефону и / или ночным курьером, используя информацию, указанную в форме заявки. Победители приза должны будут ответить на уведомление, в противном случае приз может быть аннулирован. NWF не несет ответственности за неудачные попытки уведомить победителя. Решения NWF о приемлемости победителя, уведомлении и принятии или дисквалификации будут окончательными и обязательными.Несоблюдение этих Официальных правил может привести к дисквалификации. Победитель будет размещен в социальных сетях NWF, включая Facebook и Twitter, а также на веб-сайте и / или по электронной почте после подтверждения победителя. От потенциального победителя (-ей) может потребоваться предоставить аффидевит о праве на участие / снятие ответственности / форму принятия приза (в совокупности «Аффидевит») в течение семи (7) рабочих дней с момента попытки уведомления. Родители или законные опекуны любого потенциального победителя приза, не достигшего совершеннолетия в его / ее штате проживания (который составляет восемнадцать (18) в большинстве штатов, но девятнадцать (19) в Алабаме и Небраске и двадцать один (21) в Миссисипи ) может также потребоваться подписать аффидевит, чтобы потенциальный победитель имел право на получение своего приза.Если приз или аффидевит возвращен Спонсору как недоставленный, утерян, отклонен или неисправен или если Спонсор не получит ответа от любого потенциального победителя в течение семи (7) рабочих дней с момента попытки уведомления, такой победитель может быть дисквалифицирован, и приз будет присуждается альтернативному потенциальному победителю. Несоблюдение требований приведет к дисквалификации и присуждению приза другому победителю. Если будет установлено, что какой-либо потенциальный победитель не соответствует требованиям, или если он / она не выполнил эти Официальные правила или отклонил приз по какой-либо причине до присуждения награды, такой потенциальный победитель будет дисквалифицирован, и может быть выбран альтернативный потенциальный победитель.Если по какой-либо причине больше добросовестных победителей выступят с просьбой потребовать призы, превышающие количество призов каждого типа, указанное в настоящих Официальных правилах, победители или оставшиеся победители, в зависимости от обстоятельств, из объявленного количества доступных призов может быть выбрано случайным образом из числа всех лиц, претендующих на получение такого приза. Включение в такой розыгрыш является единственным и исключительным средством правовой защиты для каждого участника при таких обстоятельствах.

9. ПРИЗЫ: Победитель, занявший первое место, получит набор «Mag and Swag», состоящий из взрослой футболки Ranger Rick, детской футболки Play Outside, а также набора Bug Box and Frame Set (MRSP of набор составляет шестьдесят восемь долларов и девяносто семь центов (68 долларов.97)). Второе место получит «Двадцать пять» (25 долларов США) прирученного животного по своему выбору, оплаченного командой Ranger Rick Outreach. И первое, и второе места, а также занявшие третье-пятое места также получат бесплатную подписку на журнал Ranger Rick или книжный клуб по своему выбору (ограничьте подписку на один журнал или книжный клуб на победителя), годовую подписку стоимостью 15 долларов США, 30 долларов США. CAN / FOR, стоимость Book Club оценивается в 76,46 долларов (1 вступление и 5 дополнительных книг).

Призы

не подлежат передаче другим лицам, денежному обмену, эквиваленту или замене, за исключением случаев, когда NWF принимает во внимание исключительное и абсолютное усмотрение.Информация о призах и их доступность могут быть изменены, и в случае, если NWF не может предоставить победителю призы, NWF может по собственному усмотрению NWF предоставить победителю приблизительную стоимость такого предмета наличными. или присудить альтернативный приз сопоставимой или большей стоимости.

ВСЕ ПРИЗЫ ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ «КАК ЕСТЬ» И БЕЗ КАКИХ-ЛИБО ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ (ВКЛЮЧАЯ, БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЙ, ЛЮБЫЕ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ ИЛИ ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ).

10. ОБЯЗАТЕЛЬНОЕ СОГЛАШЕНИЕ: Для участия в КОНКУРСЕ Участник должен согласиться с настоящими Официальными правилами («Правила»). Поскольку эти Правила образуют юридически обязывающее соглашение в отношении данного Конкурса, пожалуйста, прочтите их внимательно. Если Участник не согласен с Правилами, Участник не имеет права участвовать в КОНКУРСЕ или выиграть какой-либо из призов. Участник соглашается с тем, что его / ее регистрация в качестве индивидуального участника в рамках КОНКУРСА означает его / ее согласие с настоящими Правилами.

11. ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ: Участник предоставляет NWF всемирную, бесплатную, неисключительную, бессрочную, безотзывную, сублицензируемую и передаваемую лицензию на использование заявки, имени участника, города и штата проживания, для любых целей, в любые и все форматы СМИ и через любые и все средства распространения, в рекламных и рекламных целях, без учета, уведомления, кредита, оплаты или других обязательств перед Участниками. Во избежание сомнений, эти права включают, без ограничения, абсолютное право редактировать и / или изменять любую запись, повторно публиковать, перенаправлять и ссылаться на всю или любую часть любой записи; а также для извлечения и / или извлечения частей из любой записи для любых целей.NWF оставляет за собой право использовать (или не использовать) Заявку Участника вообще и / или в той мере, в какой она того пожелает. В той степени, в которой это разрешено применимым законодательством, Участник безоговорочно дает NWF и свое согласие на любое действие или бездействие, которое в противном случае могло бы нарушить любые моральные права, которые он может иметь в отношении Заявки и в отношении Заявки, и Участник обязуется, что он / она не будет инициировать, поддерживать или поддерживать любые претензии или судебные разбирательства о нарушении каких-либо неимущественных прав, которые он / она может иметь в отношении Заявки и / или в отношении нее.

12. ВЫБОР ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВА: КОНКУРС регулируется законами США и регулируется применимыми федеральными, государственными и местными законами и постановлениями. Участник соглашается с тем, что любые и все споры, которые не могут быть разрешены с NWF, и причины исков, возникающие из КОНКУРСА или связанные с ним, должны решаться индивидуально, без обращения к какой-либо форме группового иска, в суде компетентной юрисдикции, расположенном в Фэрфаксе. Округа, штат Вирджиния, суд которого применяет законы Содружества Вирджиния без учета норм коллизионного права.В любом таком споре участник ни при каких обстоятельствах не имеет права требовать штрафных, случайных или косвенных убытков или любых других убытков, включая гонорары адвокатов, кроме фактических личных расходов участника (если таковые имеются), связанных с участие в КОНКУРСЕ. Участник настоящим отказывается от всех прав на умножение или увеличение убытков.

13. ПРЕДУСМОТРЕННЫЕ ДЕЙСТВИЯ: Любая попытка Участника или другого лица умышленно повредить какой-либо веб-сайт или подорвать законное функционирование КОНКУРСА является нарушением уголовного и гражданского законодательства, и в случае такой попытки NWF оставляет за собой право требовать возмещения убытков в максимальной степени, разрешенной законом.

14. FORCE MAJEUR: Если по какой-либо причине КОНКУРС не может быть завершен в соответствии с планом, включая, помимо прочего, заражение компьютерным вирусом, ошибки, вмешательство, несанкционированное вмешательство, мошенничество, технические сбои или любые другие причины, не зависящие от NWF, которые нарушают или влияют на администрирование, безопасность, справедливость, целостность или надлежащее проведение КОНКУРСА, NWF оставляет за собой право по своему собственному усмотрению отменить, прекратить, изменить или приостановить КОНКУРС.

15. ГАРАНТИЯ: Принимая участие, Участник гарантирует, что его или ее материалы Заявки являются оригинальными, не нарушают права третьих лиц и что Участник получил все необходимые разрешения от любой третьей стороны в случае появления собственности третьей стороны или третьей стороны. в въезде. Участники не должны предоставлять изображения, которые связаны с умышленным преследованием дикой природы или нанесением ущерба окружающей среде со стороны Участника. NWF оставляет за собой право дисквалифицировать любую Заявку, если по собственному усмотрению обнаружит, что любая из вышеперечисленных гарантий не соответствует действительности.Решения ФНБ являются окончательными и обязательными.

16. ВЫПУСК: Путем вступления Участник освобождает и защищает NWF и ее дочерние организации, а также каждого из их директоров, должностных лиц, сотрудников, адвокатов, агентов и представителей от любой и всей ответственности за любые травмы, потери, претензии, действия , требования или ущерб любого рода, возникшие в результате КОНКУРСА или связанные с ним, любым выигранным призом, любым использованием материалов для участия со стороны NWF и предоставленными участниками гарантий, любым неправильным использованием или неисправностью любого присужденного приза, участием в любой деятельности, связанной с КОНКУРСом, или участие в КОНКУРСЕ.

17. ОГРАНИЧЕНИЕ ОТВЕТСТВЕННОСТИ: Ни при каких обстоятельствах NWF и их рекламные и рекламные агентства, или их директора, должностные лица, сотрудники, поверенные, агенты и представители не несут ответственности за любой ущерб или убытки любого рода, включая прямые косвенные. случайные, косвенные или штрафные убытки, возникшие в результате доступа Участника к NWF и веб-сайтам и их использования, а также загрузки или загрузки и / или распечатки материалов с указанных сайтов.Без ограничения вышеизложенного, все на NWF и на сайтах предоставляется «как есть» без каких-либо гарантий, явных или подразумеваемых. В некоторых юрисдикциях может быть запрещено ограничение или исключение ответственности за случайный или косвенный ущерб, поэтому некоторые из вышеупомянутых ограничений или исключений могут не относиться к вам. Ознакомьтесь с местными законами на предмет ограничений или ограничений, касающихся этих ограничений или исключений. Национальная федерация дикой природы не несет ответственности за потерянные, поврежденные, запоздалые или неправильно направленные фотографии, а также за загрузку соединений, искаженные передачи, несанкционированное вмешательство или технические неполадки.Недействительно там, где это запрещено. NWF и не несут ответственности за любую неверную или неточную информацию, вызванную пользователями веб-сайта или каким-либо оборудованием или программами, связанными или используемыми в КОНКУРСЕ, или любой технической или человеческой ошибкой, которая может произойти при обработке материалов для КОНКУРСА, включая, помимо прочего, любые опечатки или опечатки. NWF и не несет ответственности за какие-либо ошибки, упущения, прерывания, удаление, дефекты, задержки в работе или передаче, отказ линии связи, кражу или уничтожение или несанкционированный доступ к фотографиям или их изменение.NWF и не несут ответственности за какие-либо проблемы или технические неисправности любой телефонной сети или линий, компьютерного оборудования, серверов, провайдеров, компьютерных онлайн-систем, программного обеспечения или сбоев электронной почты из-за технических проблем или перегрузки трафика в Интернете или на любой веб-сайт, включая травмы или повреждение компьютера участника или любого другого лица, связанное с участием или загрузкой изображений или информации в КОНКУРСЕ, либо в результате их участия.

18. ПОЛИТИКА КОНФИДЕНЦИАЛЬНОСТИ: Предоставляя личную информацию Участника, такую ​​как адрес, номер телефона, адрес электронной почты, во время подачи заявки, Участник понимает, что NWF и может использовать эту информацию для связи с Участником в целях администрирования КОНКУРСА и соблюдения применимые законы, постановления и правила.Информация, собранная через форму заявки, будет использоваться для отправки Участнику дальнейших сообщений от NWF и относительно услуг, стимулов, предложений, рекламных акций или других сообщений, связанных с компаниями. Любая информация, полученная в ходе КОНКУРСА, должна использоваться в соответствии с настоящими Официальными правилами и Политикой конфиденциальности Спонсора, размещенной по адресу http://www.nwf.org/About/Privacy-Policy.aspx.

19. КАК С НАМИ СВЯЗАТЬСЯ: Вопросы и запросы относительно правил конкурса или технических вопросов, включая проблемы с загрузкой форм заявки или материалов, можно направлять по электронной почте на адрес galligerj @ nwf.орг.

20. ОБЩЕСТВЕННОСТЬ И СОГЛАСИЕ НА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АФФИДАВИТА. За исключением случаев, когда это запрещено законом, участие в КОНКУРСЕ означает согласие Участника на использование NWF его / ее имени, фотографий и изображений в рекламных, торговых и рекламных целях во всех средствах массовой информации без компенсации, уведомления или одобрения, включая размещение на сайте NWF] в социальной сети, включая страницу Facebook и канал Twitter, веб-сайт и / или по электронной почте. От потенциальных победителей, за исключением жителей Теннесси, может потребоваться заполнение, подписание, нотариальное заверение и возврат формы об ответственности / публичности.

21. Все налоги и другие расходы, не указанные в данном документе, включая федеральные, штатные и местные, являются исключительной ответственностью победителя, а также за соблюдение всех федеральных, государственных и местных законов и постановлений, применимых к победителю.

22. ПОЧТОВЫЙ СПИСОК: Любое лицо может исключить свое имя и адрес из всех списков, используемых NWF для рассылки конкурсов, отправив запрос на удаление в Национальную федерацию дикой природы Ranger Rick Final Fur Challenge, 11100 Wildlife Center Drive, Reston, VA 20190.

23. СПИСОК ПОБЕДИТЕЛЕЙ: Список победителей также можно получить, отправив запрос и проштампованный конверт с адресом и маркой в ​​команду Ranger Rick, Национальная федерация дикой природы, 11100 Wildlife Center Drive, Рестон, штат Вирджиния 20190.
    Глаза для фш: Наборы кистей для Фотошопа: глаза